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大鼠適應(yīng)環(huán)境2周后,開始卵巢摘除術(shù)
1.大鼠常規(guī)麻醉,固定。
2.卵巢摘除術(shù):7周雌性Wistar大鼠(200-220g)于最末肋骨下,腋中線和距脊柱外側(cè)2cm交叉處剪除長毛,常規(guī)消毒后,切開皮膚和背肌,用眼科鑷夾卵巢,分離脂肪團(tuán),結(jié)扎血管,切除卵巢,縫合肌層和皮膚。
3.術(shù)后回復(fù)2周。
4.慢性不可預(yù)知性溫和刺激(CUMS):在11種壓力源中,每天使用兩種,持續(xù)6周。按隨機(jī)順序:連續(xù)通宵照明(12小時),間歇性照明(燈亮1小時和熄滅1小時;3小時),成對籠(每個籠中2-3只動物;3小時),空籠飼養(yǎng)(18小時),物理約束(2小時) 籠傾斜45度(3小時),缺水(24小時),食物剝奪(24小時)、夾尾(1分鐘)、夜間白噪音(80-85dB;3小時)或濕墊層(400毫升水加入200克鋸末墊層;18小時)。
1.蔗糖偏好測試:這項測試在CUMS開始之前和每周結(jié)束時。大鼠單籠飼養(yǎng),給兩瓶溶液(填充1.0%蔗糖溶液)24小時。下一個24小時,將一瓶蔗糖溶液替換為水。然后,將大鼠剝奪食物和水24h,接著給予兩個預(yù)先稱重的瓶裝溶液(1.0%蔗糖溶液和普通水)1小時。每次試驗都更換瓶子的位置。測試結(jié)束后,記錄蔗糖溶液和水的消耗量。蔗糖偏好=蔗糖溶液消耗量/蔗糖溶液消耗量的量+水的消耗量。
2.強(qiáng)迫游泳試驗:一個垂直的玻璃圓筒(40厘米高,30厘米直徑),注入25±1°C的水,深度為30 cm。測試時,將每只大鼠置于圓筒中5分鐘,記錄靜止、游泳和攀爬的持續(xù)時間。檢測抑郁相關(guān)行為。
3.高架+迷宮試驗:檢測焦慮相關(guān)行為。
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