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上海乾思生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞庫(kù)>> 細(xì)胞Free Triiodothyronine(fT3)ELISA Kit

Free Triiodothyronine(fT3)ELISA Kit

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產(chǎn)品型號(hào)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-05-04 07:37:55瀏覽次數(shù):401次

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英文品名:Free Triiodothyronine(fT3)ELISA Kit
貨號(hào):80986
廠商品牌:Crystalchem
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

英文品名:Free Triiodothyronine(fT3)ELISA Kit
貨號(hào):80986
廠商品牌:Crystalchem
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
1.  試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
   建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)答:細(xì)胞計(jì)數(shù)及存活測(cè)試
1、原理:
(1)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤(pán)或是Coultercounter粒子計(jì)數(shù)器自動(dòng)計(jì)數(shù)。
(2)血球計(jì)數(shù)盤(pán)一般有二個(gè)chambers,每個(gè)chamber中細(xì)刻9個(gè)1mm2大正方形,其中4個(gè)角落之正方形再細(xì)刻16個(gè)小格,深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,每個(gè)大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時(shí),計(jì)數(shù)每個(gè)大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目,乘以稀釋倍數(shù),再乘以104,即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測(cè)試之步驟為dyeexclusion,利用染料會(huì)滲入死細(xì)胞中而呈色,而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整,染料無(wú)法滲入而不會(huì)呈色。一般使用藍(lán)色之trypan blue染料,如果細(xì)胞不易吸收trypan blue,則用紅色之Erythrosin bluish。計(jì)算細(xì)胞活率:活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×。計(jì)數(shù)應(yīng)在臺(tái)盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成,隨時(shí)間延長(zhǎng),部分活細(xì)胞也開(kāi)始攝取染料;因?yàn)榕_(tái)盼蘭對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的親和力,用不含血清的稀釋液,可以使染色計(jì)數(shù)更為準(zhǔn)確。

  ,人甲狀腺上皮細(xì)胞,人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞,人腸上皮細(xì)胞,人膀胱平滑肌細(xì)胞 4310,人腎小球系膜細(xì)胞,質(zhì)量可靠,售后有保障(編輯:tanxi)


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