色譜柱是實現(xiàn)混合物成分有效分離的重要工具,它不僅可以用于分析型的任務(wù),如定性和定量分析,也可以用于制備型的任務(wù),如純化和制備較大量的單一物質(zhì)。
分離混合物:色譜柱能夠?qū)?fù)雜的混合物中的各組分根據(jù)它們在移動相(通常是液體或氣體)和固定相(柱內(nèi)填充材料)之間的相互作用差異進行分離。
純度鑒定:通過色譜柱分離后,可以對單一物質(zhì)進行純度鑒定,確保所需成分的純凈度。
定量分析:色譜柱還可以用于定量分析,即通過測量某個組分在色譜圖上的峰面積或峰高來確定該組分的含量。
制備純化:在制備型色譜中,色譜柱用于從混合物中純化出足夠數(shù)量的目標(biāo)物質(zhì),以便于進一步的研究或應(yīng)用。
色譜柱有多種類型,它們可以根據(jù)用途、尺寸和填充材料來分類。
按用途分類:
分析型色譜柱:用于定性和定量分析,通常內(nèi)徑較小,如常規(guī)分析柱(內(nèi)徑2~5mm, 柱長10~30cm)和窄徑柱(內(nèi)徑1~2mm,柱長10~20cm)。
制備型色譜柱:用于分離純化較大量的樣品,內(nèi)徑較大,如半制備柱(內(nèi)徑>5mm)和實驗室制備柱(內(nèi)徑20~40mm,柱長10~30cm)。
按填充材料分類:
反相色譜柱:以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對較弱的官能團,如C18 (ODS)、C8 (MOS)、C4 (B)等。適用于非極性或中等極性的化合物分離。
正相色譜柱:固定相通常為硅膠或其他具有極性官能團的鍵合相填料,如胺基團 (NH2, APS) 和氰基團 (CN, CPS)。適用于極性化合物的分離。
按材質(zhì)分類:
不銹鋼色譜柱:是HPLC中較常見的類型,填充有多孔硅膠顆粒,如C18鍵合是反相HPLC的常見選擇。
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