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山中伸彌(Shinya Yamanaka)，京都大學iPS細胞研究所所長，因在“誘導多功能干細胞(induced Pluripotent Stem Cell, iPSC)”的貢獻，被授予2012年諾貝爾生理或醫(yī)學獎[1]。

“iPSC來源于病人體細胞，有望為重大疾病的新藥開發(fā)提供強有力的治療工具。”

"IPS cells can become a powerful tool to develop new drugs to cure intractable diseases because they can be made from patients' somatic cells." by Shinya Yamanaka. [2]

—山中伸彌對iPSC在臨床應用方向寄予厚望

iPSC是生物學里界內的一個重要里程碑。研究發(fā)現(xiàn)哺乳動物成熟體細胞能夠重新編程為誘導多功能干細胞，且細胞能夠進一步發(fā)育成各種其他器官類型的細胞。這一發(fā)現(xiàn)不僅*改變了人類對細胞和器官生長的理解；同時，通過對人體細胞的重新編程，為重大疾病治療提供了嶄新的應用前景。iPSC 的商業(yè)應用主要有以下四個領域：1）藥物研發(fā)，2）細胞治療，3）毒性篩選，4）干細胞生物銀行。[3]

 iPSC商業(yè)化的四個關鍵領域（圖片源自BioInformant）

相對與其他治療方法，iPSC用于細胞治療的關鍵優(yōu)勢在于倫理法規(guī)和即用型(off-on-shelf)定制。與胚胎干細胞不同，iPSC來源成體而非人類胚胎，倫理風險?。涣硪环矫?，借助基因工程技術，iPSC允許創(chuàng)建針對不同疾病的基因定制細胞系，同時降低免疫排斥風險，以實現(xiàn)即用型可大規(guī)模生產(chǎn)的細胞治療產(chǎn)品。[4]

距iPSC研究獲諾貝爾獎7年后，2019年 Fate Therapeutics公司宣布iPSC來源的CAR-NK細胞免疫產(chǎn)品FT596獲批新藥臨床研究申請。FT596源自誘導多能干細胞，除靶向CD19專利CAR以外，還具有CD16(hnCD16)Fc受體和IL15受體片段，以增強其抗體依賴性細胞毒性(ADCC)，并促進NK細胞和CD8 T細胞增殖及活化。Fate Therapeutics公司的iPSC產(chǎn)品平臺已獲得100多項專利批件和100多項待批專利申請組合，用于大規(guī)模生產(chǎn)通用NK細胞和T細胞產(chǎn)品。iPSC來源的細胞療法已開啟細胞治療3.0時代，有望改善目前細胞療法“批量到批量”工程化生產(chǎn)中成本高昂、工藝費時及產(chǎn)品顯著異質性等現(xiàn)狀。

 FT596設計圖示（圖片源自Fate）

在實際研發(fā)操作過程中，iPSC 來源的細胞分化培養(yǎng)面臨著*挑戰(zhàn)。iPSC來源的神經(jīng)元細胞通常需要進行長期培養(yǎng)（在同一個384孔板上培養(yǎng)長達數(shù)周），以獲得相對成熟的細胞。而且，我們會經(jīng)常使用老年病人來源的細胞樣本來模擬疾病，進一步增加培養(yǎng)的周期。然而，隨著培養(yǎng)時間的增加，細胞污染和聚團的風險也會增加；長期培養(yǎng)還會使每孔的細胞數(shù)具有更大的可變性；以及復雜的細胞表型會極大增加藥物評價的難度。

 基于誘導多功能干細胞iPSC來源的藥物研發(fā)平臺（圖片源自Evotech）

帶著這個行業(yè)難題，讓我們去生物科技公司Evotech一探究竟。Evotec公司總部位于德國漢堡，在歐美市場共有15個分部，在藥物研發(fā)領域有20多年的經(jīng)驗積累，與數(shù)十家生物制藥*有長期合作。在整個藥物研發(fā)管線布局中，引人矚目的是其基于誘導多功能干細胞iPSC來源的藥物研發(fā)平臺。借助于該平臺，Evotec從病人群里中獲得細胞源，并以此建立涵蓋20多種疾病的200多株iPSC生物銀行，進一步培養(yǎng)、擴增及誘導分化后，通過自動化樣品處理、多模式檢測及高內涵表型篩選系統(tǒng)組成的一體化質控分析平臺，完成多種疾病模型的藥物篩選和針對個體病人的細胞治療工作。[6]

 [藍色-細胞核；綠色-神經(jīng)元標志物 TuJ1；藍色-皮層神經(jīng)元標志物-TBR1]；高內涵表型篩選平臺用于iPSC來源的X染色體脆折癥研究 （圖片源自Evotec）

基于XLII cell::explore和Explorer G3工作站，Evotec和PerkinElmer共同開發(fā)了一個自動化平臺，用于工業(yè)級別iPSC來源細胞的培養(yǎng)。該平臺處于配備層流的無菌環(huán)境中，支持384孔iPSC來源細胞的全自動培養(yǎng)，包括細胞接種、培養(yǎng)基更換和化合物處理。由專門設計的數(shù)據(jù)庫管理孔板的處理和跟蹤，對iPSC來源的細胞進行常規(guī)監(jiān)控，以檢查污染物、細胞密度或聚團以及進行智能軟件決策，為進行大規(guī)模HTS檢測的iPSC來源細胞類型增加了*的質量控制組成部分，任何不符合QC標準的培養(yǎng)皿都會被自動放入隔離培養(yǎng)箱中。

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參考文獻

1.https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/2012/yamanaka/facts/

2.https://www.brainyquote.com/authors/shinya-yamanaka-quotes

3.https://mp.weixin.qq.com/s/bPaO6xj956XmVEAJYTKLPA

4.https://medicalxpress.com/news/2017-08-off-the-shelf-cell-therapies-multiple-myeloma.html

5.https://fatetherapeutics.com/pipeline/immuno-oncology-candidates/ft596/

6.https://www.evotec.com/en