熱變性研究可以提供大量的有關(guān)DNA分子二級(jí)結(jié)構(gòu)的信息。雙螺旋結(jié)構(gòu)由堿基對(duì)腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)和鳥嘌呤-胞嘧啶(G-C)的氫鍵連接在一起。由于G-C堿基對(duì)有3個(gè)氫鍵,而A-T堿基對(duì)有2個(gè)氫鍵,含有更多G-C成分的DNA樣品就需要更多的能量打開螺旋,形成更高的DNA融化溫度。當(dāng)DNA樣品加熱時(shí),UV/Vis分光光度法可用來(lái)監(jiān)測(cè)DNA的熱變性過(guò)程,從而判斷DNA的融化溫度tm,并終確定分子的G-C成分含量。LAMBDA 365 UV/Vis分光光度計(jì)功能強(qiáng)大,既可以進(jìn)行光譜掃描,也可以單波長(zhǎng)測(cè)量,可進(jìn)行各種生物應(yīng)用分析。本例中,我們演示了儀器和UV Express軟件進(jìn)行Calf Thymus DNA的融化曲線測(cè)量、計(jì)算融化溫度和G-C成分含量的能力。
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