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液相色譜系統(tǒng)各結(jié)構(gòu)件的注意事項
必須使用HPLC級或相當于該級別的流動相,并要先經(jīng)0.45μm薄膜過濾。
過濾后的流動相必須經(jīng)過充分脫氣,以除去其中溶解的氣體(如O2),如不脫氣易產(chǎn)生氣泡,增加基線噪聲,造成靈敏度下降,甚至無法分析。
二、管路連接的注意事項
1.將管子*插入開口端,直至其與開口端的末端相碰為止。否則將產(chǎn)生死體積,引起峰展寬。
2.為了使柱外效應減到zui小,獲得理想的分析結(jié)果,盡量使用管徑細的管路作為連接。
3.管路接頭不要擰的過緊,以防損壞螺紋。
三、色譜柱的保養(yǎng)事項
為了保護色譜柱,延長其使用壽命,在使用時應采取下列幾方面措施:應在柱頭加燒結(jié)片不銹鋼濾片,需要時加保護柱,防止柱頭堵塞,影響分析效果。當流動相的PH>7時,要用大粒度同種填料作預柱。溶劑的化學腐蝕不能太強。要避免微粒在柱頭沉降。為防止高壓沖擊,泵上的壓力限制不宜太高,一般在15~20MPa為宜,在舊柱或梯度洗脫時應稍高些,以避免因上限設置過低而造成正常使用中的中途停機。
色譜柱長時間不用,存放時,柱內(nèi)應充滿溶劑(甲醇或乙腈),兩端封死。
四、高壓恒流泵的維護注意事項
泵的密封圈是zui易磨損的部件,密封圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障,要注意保養(yǎng)和定期更換。應采取下列措施以延長使用壽命:
不允許在沒有流動相或流動相還沒有進入泵頭的情況下啟動泵而造成柱塞桿的干磨。
每天使用后應將整個系統(tǒng)管路中的緩沖液體沖洗干凈,防止鹽沉積,整個管路要浸在無緩沖液的溶液或有機溶劑中。長期不用也要定期開泵沖洗整個管路。
要用HPLC級試劑。
輸液管前端要用燒結(jié)不銹鋼沉子過濾流動相。要注意防止管路阻塞造成壓力過高而損壞儀器。
壓力下限應設置在0.5~1MPa,以防止儲液器中的流動相被抽干或嚴重滲漏而引起柱塞桿的干磨。
有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保持清洗液,否則將失去柱后清洗效果。
五、紫外檢測器的維護注意事項
要保持檢測器中的流通池清潔,每天用后注意沖洗整個管路。要定期用強溶劑反向沖洗流通池(斷開柱),以清洗流通池。
流動相要脫氣,防止氣泡滯留在流通池內(nèi),影響分析效果。
注意氘燈的保養(yǎng),及時更換。
六、氘燈的保養(yǎng)
紫外檢測器中的氘燈是有一定的使用壽命的。為了節(jié)省燈的使用壽命,在暫時不使用時可在不關機的情況下,只把燈關掉(建議:在需要關燈時間4小時以上才關燈,因為頻繁的開關燈,同樣會縮短燈的使用壽命)。