目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細胞>> YS4283C人結(jié)腸腺癌細胞SW48ATCC
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS4283C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱:人結(jié)腸腺癌細胞SW48ATCC
細胞代次:P4
細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,zui后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
原代細胞與細胞系有什么區(qū)別?細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長,分化的細胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
2、接收到的凍存細胞該如何處理?收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)?推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
售后服務(wù)告知書
1)細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
二)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
7. 視具體情況而定。
YS4272C人黑色素瘤細胞A2058
YS4273C人黑色素瘤細胞A875
YS4274C人類原巨核細胞型白血病細胞UT-7
YS4275C人肝星形細胞LX-2
YS4276C人胚腎細胞293T/17
YS4277C人成巨核細胞白血病細胞MEG-01
YS4278C人皮膚成纖維細胞HFF-1
YS4279C人結(jié)腸直腸腺癌細胞NCI-H508
YS4280C小鼠精原細胞系GC-1 spg
YS4281C小鼠精母細胞GC-2spd(ts)
YS4282C人結(jié)腸腺癌細胞LS180
YS4283C人結(jié)腸腺癌細胞SW48
YS4284C人胃癌細胞MKN-45
YS4285C人彌漫大B淋巴瘤懸浮細胞WSU-DLCL2
YS4286C人結(jié)直腸癌細胞LS513
YS4287C小鼠結(jié)腸癌細胞株MC-38
YS4288C 人乳腺癌細胞MDA-MB-436
YS4289C小鼠巨噬細胞ANA-1
YS4290C人胚腎細胞-F克隆 293F
YS4291C 人胰腺癌細胞系 SW 1990
YS4292C人胰腺癌細胞Patu8988t/Patu8988s
YS4293C鼻咽癌細胞株 5-8F
YS4294C鼻咽癌細胞株 6-10B
YS4295C人肝癌細胞Hep-G2/2.2.15
YS4296C人胃癌細胞MKN74
YS4297C人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞MuM-2B
YS4298C腦神經(jīng)瘤細胞Neuro-2a
YS4299C人子宮內(nèi)膜癌細胞HEC-1-A
YS4300C大鼠胚胎心肌細胞H9c2(2-1)
YS4301C人膽管癌細胞RBE
YS4302C人膽管細胞型肝癌細胞HCCC-9810
YS4303C人膽管癌細胞HuCC-T1
YS4304C人肺腺癌細胞Calu-3
YS4305C人卵巢顆粒細胞KGN
YS4306C人乳腺癌細胞HCC1395
YS4307C人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞SK-N-AS
YS4308C人神經(jīng)母細胞瘤細胞Sk-N-BE(2)
YS4309C小鼠卵巢癌細胞 ID8
YS4310C人乳腺癌細胞JIMT-1
YS4311C人舌磷癌細胞CAL-27
YS4312C人神經(jīng)上皮瘤細胞SK-N-MC
YS4313C慢性骨髓單核細胞性白血病MV-4-11
YS4314C大鼠肝上皮樣干細胞WB-F344
YS4315C人膽囊癌細胞NOZ
YS4316C人多發(fā)性骨髓瘤細胞 MM.1S
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