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熒光顯微鏡是利用激光、超高壓汞燈或氙燈作為光源來(lái)觀察物體中熒光物質(zhì)熒光的裝置。普通光學(xué)顯微鏡使用鹵素?zé)?span style="box-sizing: border-box; vertical-align: inherit;">發(fā)出的可見光作為光源來(lái)照亮物體并觀察反射光和透射光。
熒光顯微鏡是顯微鏡的一種，其主要觀察對(duì)象是用發(fā)出熒光的物質(zhì)標(biāo)記的生物組織和細(xì)胞。顯微鏡的分辨率取決于所用光的波長(zhǎng)，因此使用短波長(zhǎng)光的熒光顯微鏡具有空間和時(shí)間分辨率。
因此，可以獲得高度定量的信息。熒光顯微鏡變得越來(lái)越復(fù)雜，例如共焦激光顯微鏡和多光子顯微鏡，并且變得越來(lái)越重要。
熒光顯微鏡的應(yīng)用
熒光顯微鏡主要用于生物成像。具體目標(biāo)是細(xì)胞和組織，也可以在它們活著的時(shí)候進(jìn)行觀察。為了用熒光標(biāo)記目標(biāo)，需要結(jié)合使用多種技術(shù)，包括：
通過(guò)基因重組等對(duì)特定蛋白質(zhì)進(jìn)行熒光標(biāo)記的技術(shù)。
使用熒光標(biāo)記化學(xué)品標(biāo)記核酸等的技術(shù)
在特定細(xì)胞中表達(dá)熒光蛋白的技術(shù)
這些技術(shù)使我們能夠觀察目標(biāo)蛋白和表達(dá)基因的定位。此外，還開發(fā)了針對(duì)特定物質(zhì)發(fā)出熒光的藥物和蛋白質(zhì)，使得神經(jīng)活動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)動(dòng)態(tài)的可視化成為可能。
近年來(lái)，CRISPR技術(shù)的出現(xiàn)使得創(chuàng)建轉(zhuǎn)基因生物變得更加容易，并且其應(yīng)用范圍正在迅速擴(kuò)大。
熒光顯微鏡原理
熒光顯微鏡是觀察熒光的裝置。當(dāng)熒光物質(zhì)吸收特定的光作為能量（激發(fā)光）并再次釋放能量時(shí)，就會(huì)發(fā)出熒光。
激發(fā)光照射后立即發(fā)光。熒光的波長(zhǎng)比激發(fā)光的波長(zhǎng)長(zhǎng)，并且這些波長(zhǎng)根據(jù)熒光團(tuán)而變化。熒光顯微鏡具有由以下部件組成的濾光器單元，用于觀察特定的熒光。
傳輸來(lái)自光源的激發(fā)光的濾光片
允許發(fā)射的熒光通過(guò)的濾光片
防止激發(fā)光干擾熒光的鏡子
通過(guò)更換或組合濾光片單元，可以從同一樣本中觀察到多種熒光物質(zhì)。
