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更新時(shí)間:2024-05-15 20:36:40瀏覽次數(shù):269次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)CAS | n/a | 純度 | 95% |
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分子量 | n/a | 分子式 | n/a |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | mg |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),能源,制藥 | 主要用途 | 科研 |
鎳磁珠
鎳磁珠是一種廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域的磁性微球,主要用于蛋白質(zhì)的純化。這類磁珠通常由鎳離子(Ni2+)飽和的硅基磁珠制成,具有結(jié)合容量和穩(wěn)定性,特別適用于異源蛋白純化。
鎳磁珠的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
結(jié)合容量:鎳磁珠相比于鈷磁珠展現(xiàn)出較高的蛋白結(jié)合容量,特別是在處理高表達(dá)的異源蛋白時(shí),其優(yōu)勢(shì)更為明顯。
易于自動(dòng)化操作:鎳磁珠的使用可以實(shí)現(xiàn)不同體積濃度目標(biāo)蛋白的一步高通量純化,且易于自動(dòng)化操作。
可重復(fù)使用:鎳磁珠可以反復(fù)使用,再生工藝簡(jiǎn)單,這大大降低了純化成本和環(huán)境污染的風(fēng)險(xiǎn)。
穩(wěn)定性:鎳磁珠可以在變性條件下使用,例如在6MGuanadine或8MUrea的存在下,其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,不易受到競(jìng)爭(zhēng)性小分子的影響。
適用范圍廣:鎳磁珠適用于多種細(xì)胞類型和環(huán)境下的組氨酸標(biāo)簽蛋白純化,包括大腸桿菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的組氨酸標(biāo)簽蛋白。
鎳磁珠
鎳磁珠的應(yīng)用流程
使用鎳磁珠進(jìn)行蛋白質(zhì)純化的一般流程如下:
樣品處理:首先,需要對(duì)細(xì)胞或細(xì)胞提取物進(jìn)行破碎和裂解,以釋放目標(biāo)蛋白。然后,將粗蛋白樣品與預(yù)處理的鎳磁珠進(jìn)行結(jié)合。
磁珠預(yù)處理:鎳磁珠需要先進(jìn)行預(yù)處理,包括充分混勻和磁性分離,以確保其表面均勻地吸附目標(biāo)蛋白。
目標(biāo)蛋白與磁珠結(jié)合:將粗蛋白樣品加入裝有預(yù)處理鎳磁珠的離心管中,輕輕翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次,使磁珠懸浮,并在旋轉(zhuǎn)混合儀上室溫旋轉(zhuǎn)混合一段時(shí)間。然后,將離心管置于磁性分離器上進(jìn)行磁性分離,移出上清液至新的離心管中。
磁珠洗滌:通過(guò)連續(xù)洗滌步驟,使用不同的緩沖液去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)。洗滌過(guò)程通常包括加入洗滌緩沖液到裝有磁珠的離心管中,輕輕翻轉(zhuǎn)離心管數(shù)次,使磁珠重新懸浮,然后進(jìn)行磁性分離。
目標(biāo)蛋白洗脫:最后,通過(guò)逐步增加洗脫緩沖液中的咪唑濃度,逐漸釋放結(jié)合在鎳磁珠上的目標(biāo)蛋白。當(dāng)目標(biāo)蛋白全部洗脫時(shí),收集洗脫液到新的離心管中,即得到純化的目標(biāo)蛋白樣品。
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