供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250 test |
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貨號(hào) | MD-20002 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
DL-Cyto-Fix & Perm Kit主要應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子或其他細(xì)胞質(zhì)分子染色,可固定并透化細(xì)胞,進(jìn)而對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行染色。C-Perm/Wash Buffer經(jīng)過(guò)反復(fù)優(yōu)化,可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號(hào)強(qiáng)度。流式胞內(nèi)染色試劑盒
流式胞內(nèi)染色試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn)
特異性強(qiáng),熒光信號(hào)強(qiáng)度高
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱(chēng) | Cat log # | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
流式核內(nèi)染色試劑盒 | MD-20002 | 1 kit | |
Fix/Buffer (1X) | MD-20002-F | 125ml | 4℃ |
C-Perm/Wash Buffer (10X) | MD-20002-PW | 100ml | 4℃ |
試劑配制
工作濃度C-Perm/Wash Buffer(1X):將1體積C-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水,如將1ml C-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水,配制成10ml的1X C-Perm/Wash Buffer。1X C-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內(nèi)使用。
使用說(shuō)明
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1.細(xì)胞刺激:根據(jù)所使用細(xì)胞和所需檢測(cè)的分子特性,預(yù)先處理細(xì)胞。如所檢測(cè)胞內(nèi)分子為分泌型分子,需提前使用高爾基阻斷試劑阻斷檢測(cè)分子的分泌從而將所測(cè)分子滯留在細(xì)胞內(nèi)以便后續(xù)檢測(cè)。
2.表面染色(可選):收集細(xì)胞后,每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體,充分重懸細(xì)胞,4℃,避光孵育30min后,加入500ul表面染色緩沖液,300g×5min,4℃離心,棄去上清液;
3.向每管細(xì)胞中加入200ul Fix Buffer (1X),充分重懸細(xì)胞,4℃避光孵育12分鐘;
注:務(wù)必控制固定孵育溫度和時(shí)間,改變孵育條件可能導(dǎo)致染色結(jié)果誤差!注:建議細(xì)胞密度不高于10^7/ml;如細(xì)胞量多,可根據(jù)細(xì)胞量等比增加所使用Fix Buffer的量。
4.向每管細(xì)胞中加入500ul 1X C-Perm/Wash Buffer;
5.600g×5min離心,4℃,棄去上清液;
6.抗體孵育:每管加入100ul 1X C-Perm/Wash Buffer和適量體積的胞內(nèi)抗體,充分重懸細(xì)胞;
7.2-8°C避光孵育1h以上或過(guò)夜;
8.向每管細(xì)胞中添加500ul 1X C-Perm/Wash Buffer,洗去抗體;
9.600g×5min離心,4 ℃,棄去上清液;
10.將細(xì)胞重懸于300ul-500ul 1X C-Perm/Wash Buffer進(jìn)行上機(jī)分析。
注:在室溫下保存時(shí),樣品應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行上機(jī)分析;在2-8°C下保存時(shí),應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)分析樣品。