DL-Nuclear Fix/Perm Kit主要應(yīng)用于對(duì)轉(zhuǎn)錄因子、核蛋白、細(xì)胞因子和趨化因子進(jìn)行核內(nèi)染色，可固定細(xì)胞并透化細(xì)胞核核膜，進(jìn)而對(duì)核內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化，可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號(hào)強(qiáng)度。

二、產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.針對(duì)轉(zhuǎn)錄因子、核蛋白、細(xì)胞因子和趨化因子進(jìn)行核內(nèi)染色

2.特異性強(qiáng)，熒光信號(hào)強(qiáng)度高

三、產(chǎn)品成分：

四、試劑配制：

1.Fix/Perm工作液（1X）：將1體積Fix/Perm Concentrate (2X)加入1體積的Fix/Perm Diluent，如將1ml Fix/Perm Concentrate (2X) 加入1ml的Fix/Perm Diluent，配制成2ml的Fix/Perm工作液，使用前新鮮配制。

2. N-Perm/Wash Buffer工作液（1X）：將1體積N-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水，如將1ml N-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水，配制成10ml的1X N-Perm/Wash Buffer，1X N-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內(nèi)使用。

五、使用說明：

（請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn)）

1.表面染色（可選）：收集細(xì)胞后，每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體，充分重懸細(xì)胞，4℃，避光孵育30 min后，加入500 ul表面染色緩沖液，300g×5min，4℃離心，棄去上清液；

2.使用渦旋振蕩儀震蕩細(xì)胞沉淀，使其松散。

3.向每管細(xì)胞中加入500ul Fix/Perm工作液，充分重懸細(xì)胞，2-8°C避光孵育30分鐘；

4.向每管細(xì)胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液；

5.600g×5 min離心，4℃，棄去上清液；

6.每管加入100ul 1X N-Perm/Wash Buffer工作液和適量體積的胞內(nèi)抗體，充分重懸細(xì)胞；

7.2-8°C避光孵育1h以上或過夜；

8.向每管細(xì)胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液，洗去未結(jié)合抗體，600g×5 min離心，4℃，棄去上清液；

9.重復(fù)洗滌一次。

10.將細(xì)胞重懸于300-500ul N-Perm/Wash Buffer工作液進(jìn)行上機(jī)分析。