您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CS-20001-100 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品介紹
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)小鼠造血前體細(xì)胞向成熟樹突狀細(xì)胞（DC）亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在10天內(nèi)同時(shí)誘導(dǎo)不同DC亞群產(chǎn)生，主要包括傳統(tǒng)型cDC2（CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-）和漿細(xì)胞樣pDC（CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+），是研究不同亞群DC分化發(fā)育和功能、以及產(chǎn)生小鼠DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
針對(duì)培養(yǎng)小鼠成熟樹突狀細(xì)胞而設(shè)計(jì)
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Cat log # | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 | CS-20001-100 | 1 kit | |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | CS-20001-B | 100ml | 4℃ |
小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞補(bǔ)充因子 | CS-20001-S | 1ml | -20℃ |
預(yù)篩選樹突狀細(xì)胞專用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20℃ |
*培養(yǎng)基配制
（在無菌生物安全柜中，開展以下操作）
1.在4℃冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清，混勻后使用。
注：解凍后的補(bǔ)充因子和血清可放置于4℃冰箱，在1個(gè)月內(nèi)使用；或者分裝至合適體積后，保存于-20℃冰箱，不可反復(fù)凍融！2.將1體積的補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻，得到小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞*培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推。
注：配好的*培養(yǎng)基請(qǐng)于4℃保存，且于1個(gè)月內(nèi)使用完畢。使用說明
（請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn)）
1.使用淋巴細(xì)胞分離液從小鼠骨髓總細(xì)胞中分離得到骨髓單個(gè)核細(xì)胞（BM-MNC），計(jì)數(shù)。
2.D0：使用*培養(yǎng)基重懸BM-MNC，調(diào)整細(xì)胞密度至1.5*10^6/ml，按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | BM-MNC細(xì)胞數(shù)/孔 |
24孔板 | 1ml | 1.5*10^6 |
6孔板 | 4ml | 6*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱，37℃，5%CO2，靜置培養(yǎng)。
4.D3：半量換液。小心從原來的培養(yǎng)板孔中取出一半原有培養(yǎng)基，加入等量新鮮*培養(yǎng)基。
注：*培養(yǎng)基請(qǐng)恢復(fù)至室溫后使用，減少對(duì)細(xì)胞的刺激；考慮到培養(yǎng)過程中的液體揮發(fā)，加入新鮮*培養(yǎng)基時(shí)，可考慮多加10%體積*培養(yǎng)基。
5.D6：半量換液。同第4步。
6.D10：輕輕吹打細(xì)胞，收集懸浮細(xì)胞，即為分化成熟的小鼠穩(wěn)態(tài)DC，可進(jìn)行后續(xù)操作和分析。
注：如需研究特定刺激對(duì)DC的影響，可提前加入相應(yīng)刺激，待D10收集細(xì)胞進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)展示
圖：小鼠穩(wěn)態(tài)樹突狀細(xì)胞亞群分布。取4-6周齡雄性C57BL/6小鼠BM-MNC按照上述說明培養(yǎng)至第10天，收集懸浮細(xì)胞檢測(cè)DC產(chǎn)生和亞群分布。
