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重組蛋白技術(shù)具有哪些特點(diǎn)？
閱讀：747 發(fā)布時(shí)間：2023-9-6
重組蛋白（recombinant protein）是指應(yīng)用重組 DNA 或重組 RNA 技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因（gene of interest，GOI），連接到適合的表達(dá)載體，導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞，利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng)，表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達(dá)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)，酵母蛋白表達(dá)及昆蟲(chóng)細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，提高表達(dá)成功率。
重組蛋白技術(shù)實(shí)現(xiàn)了人工控制和操縱生物體的基因表達(dá)與蛋白質(zhì)生產(chǎn)的過(guò)程。主要特點(diǎn)如下:
1.設(shè)計(jì)與產(chǎn)生人工合成或改造的DNA序列,編碼 researcher 想要的蛋白質(zhì)。
2.構(gòu)建表達(dá)載體,將設(shè)計(jì)的DNA序列插入到可在某宿主細(xì)胞中表達(dá)的載體上。
3.將構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染入宿主細(xì)胞,利用宿主轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)表達(dá)重組蛋白質(zhì)。
4.從宿主細(xì)胞或培養(yǎng)上清中提取和純化重組蛋白質(zhì)。
5.對(duì)重組蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能進(jìn)行鑒定,實(shí)現(xiàn)其生產(chǎn)與應(yīng)用。
6.可以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)和商業(yè)化生產(chǎn)重組治療性蛋白質(zhì)。
7.可以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的定向進(jìn)化與改造設(shè)計(jì)。
8.實(shí)現(xiàn)重要蛋白質(zhì)的高效生產(chǎn),有助于相關(guān)基礎(chǔ)與應(yīng)用研究。