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T7 Endonuclease I

MCE 國(guó)際站：T7 Endonuclease I

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件： -20°C，1 年

簡(jiǎn)介：T7 Endonuclease I可識(shí)別并切割不完配對(duì)DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA、異源雙鏈DNA或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈DNA。

概述：T7 Endonuclease I識(shí)別并切割不完配對(duì)DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA、異源雙鏈DNA或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈DNA。該酶切割錯(cuò)配堿基5’端的第一、第二、或第三個(gè)磷酸二酯鍵。

描述：

T7 核酸內(nèi)切酶 I 可識(shí)別并切割不完配對(duì)的 DNA、十字形結(jié)構(gòu) DNA、霍利迪結(jié)構(gòu)或交叉 DNA、異源雙鏈 DNA，或以較慢的速度切割缺口雙鏈 DNA。該酶可切割錯(cuò)配堿基 5' 端的第一個(gè)、第二個(gè)或第三個(gè)磷酸二酯鍵。

操作說(shuō)明：1) 分別以突變體DNA和野生型DNA為模板，PCR擴(kuò)增含突變位點(diǎn)的片段，片段長(zhǎng)度約500bp， 突變位點(diǎn)避免位于片段中間，便于區(qū)分切割后條帶；2) 變性退火PCR產(chǎn)物3) 酶切反應(yīng)：上 步反應(yīng)液中加入0.5 μL T7 E1酶，37℃保溫15-30min，立即加入DNA loading buffer終止反應(yīng)，混勻后65℃保溫10min，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)酶切結(jié)果。

注意事項(xiàng)：1. 用T7核酸內(nèi)切酶I是一種具有底物結(jié)構(gòu)選擇性的酶。該酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物時(shí)，必須控制酶量和反應(yīng)時(shí)間。反應(yīng)溫度超過(guò)42℃時(shí)，會(huì)增加非特異性核酸酶活性。避免反應(yīng)溫度超過(guò)55℃，會(huì)導(dǎo)致酶活性降低。2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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