Phi29 DNA Polymerase
MCE 國(guó)際站:Phi29 DNA Polymerase
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件: -20°C,1 年
簡(jiǎn)介:Phi29 DNA Polymerase是從Bacillus subtilis噬菌體Phi29中克隆出的嗜溫DNA聚合酶。
概述:Phi29 DNA Polymerase是從Bacillus subtilis噬菌體Phi29中克隆出的嗜溫DNA聚合酶,在大腸桿菌表達(dá)后經(jīng)多次純化分離得到。Phi29 DNA Polymerase具有特殊的鏈置換活性和高效的連續(xù)合成特性,對(duì)模板有很強(qiáng)的結(jié)合能力,可連續(xù)合成多達(dá)70kb的DNA片段而不從模板上解離。同時(shí)該酶具有很強(qiáng)3′→5′外切酶校正功能,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。
描述:
Phi29 DNA聚合酶具有特殊的鏈置換活性和高效的連續(xù)合成特性,對(duì)模板結(jié)合能力強(qiáng),可連續(xù)合成長(zhǎng)達(dá)70kb的DNA片段而不與模板解離。同時(shí)該酶具有很強(qiáng)的3′→5′外切酶校正功能,保真度比Taq DNA聚合酶高100倍。
操作說明:測(cè)序質(zhì)粒模板的制備1) 樣品處理:在平板上挑取單克隆到10 μL無菌水中,取1 μL進(jìn)行反應(yīng)。2) 樣品預(yù)變性與質(zhì)粒擴(kuò)增:按照反應(yīng)體系,先進(jìn)行預(yù)變性,并使引物與質(zhì)粒進(jìn)行退火,加入其它成分后30℃擴(kuò)增過夜。常用反應(yīng)體系如下(50 μL體系)3) 擴(kuò)增效果檢測(cè)(可選測(cè)):將擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,如存在合適的酶切位點(diǎn),可進(jìn)行酶切反應(yīng)檢測(cè)。4) 熱失活:65℃,10min。5) 測(cè)序反應(yīng):取上述反應(yīng)液2 μL加8 μL無菌水,即可用于直接測(cè)序。
注意事項(xiàng):1. 本品靈敏度高,注意防止模板污染。2. Phi29 DNA聚合酶具有強(qiáng)的3′→5′外切酶活性,能夠降解引物,擴(kuò)增反應(yīng)中應(yīng)使用經(jīng)過硫代修飾的隨機(jī)引物。3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
熱銷產(chǎn)品:Anifrolumab | Sitagliptin | AVE 0991 | SB 525334 | GSK682753A | OSS_128167 | L-Arginine | L-Glutamine | SKL2001 | DL-Isocitric acid (trisodium salt)
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