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O-Glycosidase

MCE 國際站：O-Glycosidase

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20°C，1 年

簡介：O-Glycosidase具有高度特異性，可從絲氨酸、蘇氨酸殘基或者作為糖肽或糖蛋白的一部分釋放 Galβ1-3GalNAc。應用于糖蛋白的生物合成分析，O-聚糖的生物活性蛋白質O-糖基化檢測和結合位點分析。

概述：O-Glycosidase，大腸桿菌中重組表達，來源于 Streptococcus pneumoniae，具有高度特異性，可催化絲氨酸、蘇氨酸殘基或糖蛋白去除連接二糖，釋放 Galβ 1-3GalNAc。該酶可應用于糖蛋白的生物合成分析，O-聚糖的生物活性蛋白質 O-糖基化檢測和結合位點分析。

描述：

O-糖苷酶具有高度特異性，可以從絲氨酸、蘇氨酸殘基或作為糖肽或糖蛋白的一部分釋放出Galβ1-3GalNAc。應用于糖蛋白生物合成分析、O-聚糖生物活性蛋白O-糖基化檢測和結合位點分析。

操作說明：1、使用前準備將 O-Glycosidase 試劑取出，加入 30-50 µL ddH2O 溶解，10000 rpm 離心 10 s，確保所有試劑都在管底。其他緩沖液從 -20°C 冰箱中取出待用。2、變性條件下糖蛋白去糖基化1) 用 ddH2O 溶解 1-20 µg 的糖蛋白，加入 1 µL 的 10× Glycoprotein Denaturing Buffer，用 ddH2O 定容至 10 µL，75°C 孵育 10 min。2) 加入 2 µL 的 10× GlycoBuffer 2 和 2 µL 的 10% NP-40，輕輕混勻。3) 加入 1-4 µL 的 O-Glycosidase，加 ddH2O 至 20 µL，輕輕混勻，37°C 孵育 1-4 h。4) 用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。3、非變性條件下糖蛋白去糖基化1) 取 10-100 µg 糖蛋白溶液，加入 2 µL 10× Glyco 緩沖液和 2-5 µL O-Glycosidase，補加 ddH2O 使得反應體系總體積為 20 µL，輕輕混勻。2) 37°C 條件下反應 4-24 h。注：當對天然糖蛋白去糖基化時，建議將等量糖蛋白樣品進行變性后再同步進行酶切實驗作為陽性對照，以確定非變性條件下去糖基化反應的程度。

注意事項：1. 體系放大時，孵育時間和酶量需要根據實際情況調整，低速震蕩混勻可以提高轉化率。2. 本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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