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BsmB I

MCE 國際站：BsmB I

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20°C 兩年

簡介：BsmB I 屬于 Type IIs 型內(nèi)切酶中的一種，可識別非回文序列，并在識別序列之外進(jìn)行切割，常用于 Golden Gate 組裝。BsmB I 的同裂酶有：Esp3 I，BstGZ53 I，Esp16 I，Esp23 I。

概述：BsmB I 屬于 Type IIs 型內(nèi)切酶中的一種，可識別非回文序列，并在識別序列之外進(jìn)行切割，常用于 Golden Gate 組裝。其在 55℃ 具有最佳切割效果。BsmB I的儲存緩沖液中預(yù)混了 BSA，可增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性，并能與 DNA 制劑中可能存在的污染物結(jié)合。BsmB I 的同裂酶有：Esp3 I，BstGZ53 I，Esp16 I，Esp23 I。

描述：

•    BsmB I 是 II 型內(nèi)切酶之一，可識別非回文序列并在識別序列之外進(jìn)行切割，常用于 Golden Gate 組裝。BsmB I 在 55℃ 時切割效果好。為確保一致的性能，本產(chǎn)品含有預(yù)混的 BSA，可增強(qiáng) BsmB I 的穩(wěn)定性并結(jié)合 DNA 制劑中可能存在的污染物。 同裂酶：Esp3 I、BstGZ53 I、Esp16 I、Esp23 I.

•   切割位點(diǎn)：

5'…CGTCTC (N)₁^▼…3'


3'…GCAGAG (N)_5▲…5'

操作說明：1. DNA 酶切流程1.1 在冰上配制反應(yīng)體系注： DNA 底物中應(yīng)不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗滌劑或高濃度鹽，否則將會影響 BsmB I 酶活性。1. 2 輕輕吸打或輕彈管壁混勻反應(yīng)液。切勿渦旋。瞬時離心收集掛壁液滴。1. 3 55°C 孵育 15-60 min。一般推薦 5-10 U 酶/μg 質(zhì)粒 DNA、10-20 U 酶/μg 基因組 DNA。如需過夜，請將酶量調(diào)整至 1 U。1. 4 （可選步驟）80°C 孵育 20 min 可使酶失活，停止反應(yīng)。也可通過吸附柱或苯酚/氯仿純化終止反應(yīng)。2. 小體系反應(yīng)體系注：若總反應(yīng)體系為 10 μL，孵育時間不要超過 1 h，避免蒸發(fā)。

注意事項(xiàng)：1. 反應(yīng)體系中加入的酶體積不應(yīng)超過總體積的 10%，避免酶中過多的甘油引起星號活性。2. 限制性內(nèi)切酶儲存緩沖液中的添加劑 (如甘油、鹽) 與底物溶液中的污染物 (如鹽、EDTA 或乙醇等) 相同，反應(yīng)體積越小，酶切反應(yīng)抑制效應(yīng)越強(qiáng)。3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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