Red 核酸膠染料
MCE 國(guó)際站:Red Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件:4°C 避光保存 一年
簡(jiǎn)介:Red Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 是一種靈敏度高、安全性好、適用性強(qiáng)且穩(wěn)定性高的核酸凝膠染色試劑。
概述:Red Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)(以下簡(jiǎn)稱Red Stain)是一種靈敏度高、安全性好、適用性強(qiáng)且穩(wěn)定性高的核酸凝膠染色試劑。Red Stain 不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。Red Stain的檢測(cè)靈敏度高于EB,在波長(zhǎng) 304 nm 紫外光附近可獲得最佳激發(fā)狀態(tài) (最大發(fā)射波長(zhǎng)為 608 nm),適用于原先使用 EB 為染料的凝膠成像系統(tǒng)。Red Stain 適用于瓊脂糖凝膠電泳或聚丙烯酰胺凝膠電泳的 dsDNA,ssDNA 以及 RNA 檢測(cè)。電泳檢測(cè)時(shí),既可在電泳前進(jìn)行染色 (預(yù)染染色法、膠染法),也可在電泳后進(jìn)行染色 (后染染色法、泡染法),使用方便、靈活。
描述:
與 EB 相比,紅色核酸凝膠染料(紅色染料)在高于凝膠染色所用工作濃度時(shí)無(wú)法穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。紅色染料具有與 EB 相同的光譜,可在成像系統(tǒng)中以相同的方式使用。此外,Red Stain 的靈敏度也比 EB 高。
• 無(wú)法穿透細(xì)胞膜
• 靈敏度高:比 EB 更靈敏
• 信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低
• 適用性強(qiáng):可染色 dsDNA、ssDNA 或 RNA
• 使用方便:與 EB 類似,無(wú)需更換緩沖液或檢測(cè)設(shè)備
操作說(shuō)明:Red Stain 用于電泳檢測(cè) DNA 時(shí),既可在電泳前染色 (預(yù)染、膠染),也可電泳后進(jìn)行染色 (后染、泡染)。1) 膠染法a. 根據(jù)需要配制適當(dāng)濃度的瓊脂糖膠液。在瓊脂糖融解,適當(dāng)冷卻后,按照每50 mL 膠液加入5 μL 染料的比例 (1×) 加入Red Stain?;靹蚝蠹纯砂循傊悄z液倒入制備凝膠的模具中。b. 膠液凝固后,按常規(guī)方法上樣電泳,電泳結(jié)束后即可在紫外照射下觀察。注:a). Red Stain 具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖膠液中直接添加,不需要等待膠液冷卻。也可將 Red Stain 預(yù)先與含有瓊脂糖粉末的電泳緩沖液混合,加熱制膠。b). 膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。2) 泡染法a. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳,不需要在制膠時(shí)加入任何染料。b. 將 Red Stain 稀釋約 3,300 倍到 0.1 M NaCl 中,制成 3× Red Stain 染色液 (例如將 15 μL Red Stain 加到 50 mL 0.1 M NaCl 溶液中)。c. 將凝膠浸入 3× Red Stain 染色液中,室溫避光震蕩染色 30 分鐘。染色時(shí)間根據(jù)膠濃度及厚度確定,膠越厚、濃度越高則所需的染色時(shí)間越長(zhǎng)。d. 染色結(jié)束后即可在紫外照射下觀察。注:用泡染法染色時(shí),染料用量較多,單次使用的 3× Red Stain 染色液可重復(fù)使用 3 次左右。3× Red Stain 染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
注意事項(xiàng):1) 膠染法中觀察到條帶彌散、拖尾時(shí),建議使用泡染法(后染)代替膠染法(前染),如果泡染法染色后仍然出現(xiàn)類似的問(wèn)題,請(qǐng)嘗試以下方法:更換新鮮配制的電泳緩沖液,TBE 緩沖液比 TAE 效果好,因?yàn)楹鹚猁}的試劑導(dǎo)電性更好;嘗試 1/3 或 1/5 的常用上樣量,Red Stain 比 EB 更加靈敏,條帶的彌散或拖尾可能是超載造成的;使用低濃度的瓊脂糖凝膠檢測(cè)大片段 DNA 等。2) Red Stain 可以用來(lái)染色 ssDNA 和 RNA,Red Stain 對(duì) dsDNA 的靈敏度是對(duì) ssDNA 或 RNA 的兩倍。3) Red Stain 作為熒光染料需避光保存,在使用過(guò)程中的常規(guī)室內(nèi)光照不會(huì)影響其使用效果。4) 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。5) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見(jiàn)問(wèn)題:1) 不能透過(guò)細(xì)胞膜。2) 高靈敏度:適用于各種大小片段的核酸電泳染色,靈敏度高于 EB。3) 高信噪比:核酸樣品熒光信號(hào)強(qiáng),而背景光弱。4) 熱穩(wěn)定性好,耐光性強(qiáng)。5) 易使用:使用方法同 EB,無(wú)須更換檢測(cè)儀器。
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