CHO 磁珠
MCE 國(guó)際站:CHO Magnetic Beads (200 nm, 10 mg/mL)
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件:4°C,2 年禁止凍結(jié)
簡(jiǎn)介:MCE CHO Magnetic Beads (200nm, 10mg/mL) 表面修飾高密度的醛基官能團(tuán),可與蛋白或其他分子上的伯氨基團(tuán)形成穩(wěn)定的席夫堿結(jié)構(gòu),可用于親和純化抗原、抗體和其他生物分子。
概述:MCE CHO 磁珠 (200nm,10mg/mL) 表面修飾高密度的醛基官能團(tuán),可與蛋白或其他分子上的伯氨基團(tuán)形成穩(wěn)定的席夫堿結(jié)構(gòu),可用于親和純化抗原、抗體和其他生物分子。與傳統(tǒng)的氨基、羧基磁珠相比,CHO 磁珠無(wú)需使用戊二醛活化,只需將含有伯氨基的生物配體溶解在 PBS 中,室溫孵育便可將生物配體共價(jià)偶聯(lián)到磁珠上,具有操作簡(jiǎn)單、偶聯(lián)條件溫和、快速高效等優(yōu)點(diǎn)。醛基可與氨基共價(jià)結(jié)合,因此磁珠偶聯(lián)過(guò)程必須在不含任何氨基的緩沖液中進(jìn)行,也可結(jié)合自動(dòng)化設(shè)備,用于多樣品的篩選。
描述:
MCE CHO磁珠(200nm,10mg/mL)含有CHO功能團(tuán),能與蛋白質(zhì)或其他分子上的伯胺反應(yīng)形成穩(wěn)定的酰胺鍵,可共價(jià)固定蛋白質(zhì),用于抗體、抗原等生物分子的親和純化。與傳統(tǒng)的羧基和氨基磁珠相比,CHO磁珠無(wú)需經(jīng)過(guò)戊二醛活化,只需將含伯胺的生物配體溶解于PBS中,室溫孵育即可將生物綴合物共價(jià)偶聯(lián)到磁珠上,操作簡(jiǎn)便,偶聯(lián)條件溫和,快速高效。CHO具有與氨基形成共價(jià)鍵的能力,因此磁珠偶聯(lián)過(guò)程必須在不含任何胺的緩沖溶劑中進(jìn)行,自動(dòng)化儀器尤其適用于多樣品的大批量篩選。
操作說(shuō)明:磁珠與生物分子的偶聯(lián)方法 (僅供參考)以磁珠樣品 500 μL,生物分子樣品 50-200 μg,采用 1.5 mL EP 管為例介紹??筛鶕?jù)需求按比例調(diào)整。磁珠預(yù)處理充分混勻磁珠,取 500 μL 磁珠置于 1.5 mL EP 管中,加入 1 mL 洗滌緩沖液,充分混勻, 置于磁力架,磁性分離,棄上清;重復(fù)以上洗滌步驟2次磁珠偶聯(lián)在磁珠中加入 50-200 μg 生物配體(具體用量及濃度可根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,保持體系 pH 在 8.0左右),輕柔混勻,避光條件置于翻轉(zhuǎn)混合儀室溫偶聯(lián)孵育 1-4 h 或 4 C 偶聯(lián)孵育過(guò)夜封閉磁性分離去除上清液,加入 500-1000 μL 封閉緩沖液重 磁珠,避光條件置于翻轉(zhuǎn)混合儀室溫偶聯(lián)孵育 2-4 h 或 4 C 偶聯(lián)孵育過(guò)夜保存磁性分離去除上清液,加入適量?jī)?chǔ)存緩沖液重 磁珠(可根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)確定最終儲(chǔ)存緩沖液用量以調(diào)整偶聯(lián)配體磁珠的濃度),4℃ 保存。
注意事項(xiàng):1. 本品磁珠對(duì)水敏感,每次取樣后請(qǐng)立即蓋上瓶蓋,并用封口膜密封,置于 4℃ 保存。2. 請(qǐng)勿離心、干燥或冷凍磁珠。以上操作可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán),并影響磁珠的結(jié)合活性。3. 建議根據(jù)粗樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)的含量?jī)?yōu)化磁珠用量,磁珠用量過(guò)多會(huì)導(dǎo)致背景值升高,而磁珠用量太少則會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量降低。每毫克磁珠通常可結(jié)合 1-20 μg 目標(biāo)蛋白。4. 蛋白穩(wěn)定劑 (如 BSA,明膠等) 會(huì)抑制抗體與磁珠的偶聯(lián),請(qǐng)確??贵w儲(chǔ)存液中不含蛋白穩(wěn)定劑。5. 含伯氨的緩沖液會(huì)抑制蛋白與磁珠的偶聯(lián),可采用透析或脫鹽的方法去除緩沖液中含伯氨的物質(zhì)。6. 本產(chǎn)品需要與其配套的磁性分離設(shè)備 (例如磁力架,MCE 貨號(hào) HY-K0200) 聯(lián)用。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。8. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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