Anti-GST 磁珠
MCE 國際站：Anti-GST Magnetic Beads
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4°C ，2 年 禁止凍結(jié)
簡介：Anti-GST Magnetic Beads 用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統(tǒng)中 GST 標記蛋白的免疫沉淀 (IP) 實驗。
概述：MCE Anti-GST Magnetic Beads 由高質(zhì)量的鼠源 IgG 單克隆抗體與磁珠共價偶聯(lián)制備，具有較高的 GST 標簽融合蛋白加載容量 (＞0.6 mg 蛋白/mL)，可用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統(tǒng)中 GST 標記蛋白的免疫沉淀 (IP) 實驗。本產(chǎn)品可以通過磁力架 (MCE 產(chǎn)品目錄號：HY-K0200) 或自動分離儀器分離，實驗便捷有效。本產(chǎn)品蛋白荷載量高，特異性強，也可用于免疫共沉淀 (Co-IP)和小量的蛋白質(zhì)純化。
描述：
MCE 抗 GST 磁珠基于氨基磁珠，粒徑為 200 nm，共價結(jié)合識別 GST 序列的高質(zhì)量小鼠 IgG 單克隆抗體?？?GST 磁珠用于在細菌和哺乳動物細胞以及體外表達系統(tǒng)中表達的特定 GST 標記蛋白的免疫沉淀 (IP)。使用磁力架手動或使用儀器自動從溶液中取出磁珠?？笹ST磁珠對GST標簽蛋白的負載量高，特異性強，也適用于GST標簽蛋白的免疫共沉淀和純化。
免疫沉淀過程中，僅需少量磁珠，非特異性結(jié)合率低。
• 方便省時。
• 非特異性結(jié)合率低。
• 樣品損失最小。
• 蛋白結(jié)合能力高達0.6 mg/mL。
• 穩(wěn)定，一瓶解決方案。
操作說明：1. 磁珠預(yù)處理混懸 Anti-GST Magnetic Beads，取 20 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 μL 洗滌緩沖液，充分混懸，置于磁力架上磁性分離，棄上清。重復(fù)以上洗滌步驟 2 次。2. 樣品的結(jié)合在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 細胞裂解液，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育，室溫孵育 2 小時或 4oC 條件下孵育過夜。置于磁力架上磁性分離，棄上清。注意：結(jié)合過程中，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響實驗結(jié)果3. 洗滌在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上洗滌步驟 3 次，直到洗滌后的上清液中 OD280 小于0.05 為止。注意：如上清液的 OD280 大于 0.05，適當(dāng)增加洗滌次數(shù)即可。4. 洗脫本說明書提供兩種 GST 標簽蛋白洗脫方案，操作者可以根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的洗脫方案。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻，95oC 加熱 5 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，進行 SDS-PAGE 檢測。b. 酸性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 50 μL 的洗脫緩沖液，混合均勻，室溫孵育 10 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，按每 50 μL 洗脫液加入 25 μL 中和緩沖液的比例加入中和緩沖液，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性，樣品用于后期功能分析。
注意事項：1. 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8，禁止凍結(jié)。2. 本產(chǎn)品應(yīng)避免離心、干燥或凍存，禁止長時間置于磁場，可能會引起磁珠聚團，操作過程應(yīng)輕柔，避免抗體脫落。3. 使用本產(chǎn)品進行IP實驗前，需先確認樣品中GST 標簽融合蛋白的表達情況。4. 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解，請配合使用MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號：HY-K0010，HY-K0011)。5. 不要使用含有dithiothreitol (DTT) 的細胞裂解液樣品，DTT可能會引起磁珠上的 GST 抗體脫落。6. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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