鏈霉親和素磁珠
MCE 國際站：Streptavidin Magnetic Beads
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4°C，1 年
簡介：Streptavidin Magnetic Beads 用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。
概述：MCE Streptavidin Magnetic Beads 使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面，形成單分子固定層，可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。由于具有單層的鏈霉親和素，其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素，而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標，使用簡單有效。形狀確定的特異性表面便于進行高效捕獲、分離和下游操作，可保證批次一致性和結(jié)果的可重復性。MCE Streptavidin Magnetic Beads 是以聚合物為基材的實心磁珠微球，主要用于免疫檢測、免疫沉淀、分離核酸、細胞分選等。
描述：
MCE 鏈霉親和素磁珠使用重組鏈霉親和素共價結(jié)合到順磁珠表面。鏈霉親和素沒有碳水化合物基團，與親和素不同，可確保低非特異性結(jié)合。由于鏈霉親和素和生物素之間的高親和力，生物素化的分子（例如肽、蛋白質(zhì)、抗體、糖、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA）可與磁珠結(jié)合。 MCE 鏈霉親和素磁珠可通過磁力架手動從溶液中取出，或使用儀器自動取出。
• 高結(jié)合能力。
• 低非特異性結(jié)合。
• 樣品損失最小。
• 即用型。
操作說明：1. 固定化核酸(1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注意：用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結(jié)合飽和。(2)加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。(3) 加入 500 μL 用 Wash Buffer I 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育(室溫, 30 分鐘；4°C, 2 小時)。(4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。(5)加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。注意：可通過測定反應前后核酸的濃度，計算結(jié)合到磁珠上的核酸量。2. 固定化抗體/蛋白：(1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注意：用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結(jié)合飽和。(2)加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。(3) 加入 1 mL 用 Wash Buffer II 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉(zhuǎn)混合儀上旋轉(zhuǎn)孵育(室溫, 60 分鐘；4°C, 4 小時)。(4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。(5)加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟4次。3. 洗脫3.1 生物素標記核酸的洗脫步驟：向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ，65°C 孵育 5 分鐘或 90°C 孵育 2 分鐘，置于磁力架，磁性分離，收集上清。3.2 生物素標記抗體/蛋白的洗脫本說明書提供以下兩種洗脫方案，操作者可根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的洗脫方法。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS–PAGE 檢測。步驟：向磁珠中加入 50–100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻， 95°C 加熱 5 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清，進行 SDS-PAGE 檢測。注：如果選擇變性洗脫，那么洗脫液將包含鏈霉親和素單體和聚體、生物素標記抗體或蛋白b. 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：向磁珠中 50–100 μL Elution Buffer Ⅱ，室溫孵育 5–10 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性，樣品用于后期功能分析。注：如果選擇非變性洗脫，酸性條件下鏈霉親和素可能會脫落，需注意孵育時間不要超過 10 分鐘；酸性洗脫液能破壞大部分的抗體與抗原的相互作用，但為了更好的洗脫效果，可預先用 1 mL 0.1% Tween-20 的水溶液洗滌磁珠 1 次。
注意事項：1. 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8，禁止凍結(jié)。2. 本產(chǎn)品應避免離心、干燥或凍存，禁止長時間置于磁場，可能會引起磁珠聚團，降低結(jié)合活性。3. 從磁珠保存管中移取磁珠前應充分振蕩混勻，操作過程中動作應輕柔，并避免產(chǎn)生氣泡。4. 生物素化樣品準備過程中，在生物素標記好蛋白或核酸后，用脫鹽柱去掉多余的游離生物素。5. 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解，請配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號：HY-K0010，HY-K0011)。6. 生物素化分子的大小會影響磁珠的載量，用戶需要根據(jù)實驗確定磁珠對特定生物素化分子的載量。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。8. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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