JC-1

MCE 國(guó)際站：JC-1

CAS：3520-43-2

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件：4°C, sealed storage, away from moisture and light

生物活性：JC-1 (CBIC2) 是一種熒光親脂性羰花青染料，用于測(cè)量線粒體膜電位。 JC-1 在高 ΔΨm 處形成稱為 J-聚集體的復(fù)合物。 JC-1 的聚集體發(fā)出橙紅色熒光 (Ex/Em=585/590 nm)。在具有低 ΔΨm 的細(xì)胞中，JC-1 保持單體形式。 JC-1 單體發(fā)出綠色熒光 (Ex/Em=510/527 nm)。 體外： 指南（以下是我們推薦的方案。該方案僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的具體需要進(jìn)行修改）。
細(xì)胞標(biāo)記：
1. 在 6、12、24 或 96 孔板中以 5×10⁵ 細(xì)胞/mL 的密度培養(yǎng)細(xì)胞。根據(jù)您的正常方案孵育細(xì)胞。
2. 確保 JC-1 和 DMSO 已平衡至室溫，然后將一小瓶?jī)?nèi)容物溶解在提供的 DMSO 中，制備 200 μM 儲(chǔ)備液。
3. 對(duì)于對(duì)照管，讓CCCP 小瓶達(dá)到室溫，加入1 μL CCCP (50 mM)。在 37°C 下孵育細(xì)胞 5 分鐘。
4. 每孔加入10 μL JC-1 (200 μM)，使終濃度為2 μM。在 37°C、5% CO₂ 下孵育細(xì)胞 15-20 分鐘。如果后面有附加標(biāo)簽，例如使用膜聯(lián)蛋白 V，則從步驟 2.a 開始。如果不是，請(qǐng)繼續(xù)執(zhí)行步驟 1.e。
5. 孵育后，4℃，400×g離心細(xì)胞3-4分鐘，小心吸去上清液。
6. PBS(1×)洗細(xì)胞2次：加入2mL PBS(1×)重懸細(xì)胞，渦旋混勻。在 4°C 下以 400×g 離心細(xì)胞 3-4 分鐘，小心吸出上清液。
7. 加入500 μL PBS（1×）懸浮細(xì)胞。在流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀上分析樣本。

體外：指南（以下是我們推薦的方案，本方案僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的具體需要進(jìn)行修改）。
細(xì)胞標(biāo)記：
1. 在 6、12、24 或 96 孔板中以 5×10⁵ 細(xì)胞/mL 的密度培養(yǎng)細(xì)胞。根據(jù)您的正常方案孵育細(xì)胞。
2. 確保 JC-1 和 DMSO 已平衡至室溫，然后將一小瓶?jī)?nèi)容物溶解在提供的 DMSO 中，制備 200 μM 儲(chǔ)備液。
3. 對(duì)于對(duì)照管，讓CCCP 小瓶達(dá)到室溫，加入1 μL CCCP (50 mM)。在 37°C 下孵育細(xì)胞 5 分鐘。
4. 每孔加入10 μL JC-1 (200 μM)，使終濃度為2 μM。在 37°C、5% CO₂ 下孵育細(xì)胞 15-20 分鐘。如果后面有附加標(biāo)簽，例如使用膜聯(lián)蛋白 V，則從步驟 2.a 開始。如果不是，請(qǐng)繼續(xù)執(zhí)行步驟 1.e。
5. 孵育后，4℃，400×g離心細(xì)胞3-4分鐘，小心吸去上清液。
6. PBS(1×)洗細(xì)胞2次：加入2mL PBS(1×)重懸細(xì)胞，渦旋混勻。在 4°C 下以 400×g 離心細(xì)胞 3-4 分鐘，小心吸出上清液。
7. 加入500 μL PBS（1×）懸浮細(xì)胞。在流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀上分析樣本。

熱銷產(chǎn)品：Clarithromycin  | PAR-4 Agonist Peptide, amide (TFA)  | 2OH-BNPP1  | Pimozide  | Sintilimab  | ATP-polyamine-biotin  | TAPI-2  | Fmoc-Gly-Gly-Phe-OH  | Prim-O-glucosylcimifugin  | Glycine

研究領(lǐng)域：Others

作用靶點(diǎn)：Fluorescent Dye

熱門產(chǎn)品線：重組蛋白  |  化合物庫(kù)  |  天然產(chǎn)物  |  熒光染料  |  PROTAC  |  同位素標(biāo)記物  |  寡核苷酸

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻(xiàn)：

[1]. A Perelman, et al. JC-1: alternative excitation wavelengths facilitate mitochondrial membrane potential cytometry. Cell Death Dis. 2012 Nov 22;3:e430.[2]. Vera C. Keil, et al. Ratiometric high-resolution imaging of JC-1 fluorescence reveals the subcellular heterogeneity of astrocytic mitochondria. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology. 2011,462(5): 693-708.[3]. Jung-Ho LEE, et al. Real-time analysis of amyloid fibril formation of α-synuclein using a fibrillation-state-specific fluorescent probe of JC-1. Biochem. J. 2009, 418:311-323.[4]. Salvioli S, et al. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis. FEBS Lett. 1997 Jul 7;411(1):77-82.