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訪問(wèn)次數(shù):204更新時(shí)間:2023-06-08 16:00:52
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一、深圳艾瑞斯生產(chǎn)的金霉素快速檢測(cè)試劑盒概要金霉素是以四并苯為母核的一族抗生素,其中四環(huán)素、土霉素、金霉素及多西環(huán)素以其優(yōu)良的抗菌性、穩(wěn)定的藥性及低廉的價(jià)格,在畜牧業(yè)生產(chǎn)中廣泛用于疾病的治療和預(yù)防及促進(jìn)生長(zhǎng)。但該類藥物過(guò)量使用會(huì)導(dǎo)致畜產(chǎn)品中高濃度藥物殘留,直接影響消費(fèi)者身體健康。高效液相色譜法目前是分析四環(huán)素類藥物殘留量的主要方法,但需要一系列繁瑣的提取和凈化處理步驟,而且存在回收率低,雜質(zhì)干擾大等問(wèn)題。本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測(cè)產(chǎn)品,能最大限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。
二、金霉素快速檢測(cè)試劑盒原理
金霉素檢測(cè)試劑采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)組織、蜂蜜、雞蛋等樣本中的金霉素類藥物,試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的金霉素類藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗金霉素類藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含金霉素藥物含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中金霉素類藥物的殘留量。
三、適用范圍
金霉素檢測(cè)試劑盒可定量、定性檢測(cè)組織、蜂蜜等樣本中金霉素的藥殘留量。
四、技術(shù)指標(biāo)
1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2 反應(yīng)模式:37℃,30min~30min~15min。
3 檢測(cè)下限:
組織樣本(雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚、雞蛋):0.3ppb 蜂蜜樣本:2ppb
4 交叉反應(yīng)率:
金霉素:100%
5 樣本回收率:
組織(雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚):85±20% 蜂 蜜:75±20%
五、試劑盒組成
酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)液(6個(gè))、高標(biāo)準(zhǔn)液、酶標(biāo)記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復(fù)溶液
六、貯藏條件及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實(shí)驗(yàn)開始前需配制標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液;低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品不穩(wěn)定,需現(xiàn)配現(xiàn)用。
在0ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml,0.2ppb、0.6ppb、1.8ppb、5.4ppb的瓶中分別加復(fù)溶液2ml,16.2ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml。
標(biāo)準(zhǔn)液6:取1.0ppm高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液48.6ul加入裝有3ml 復(fù)溶液16.2ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為16.2ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液5:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液6加入裝有2ml 復(fù)溶液5.4ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為5.4ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液4:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液5加入裝有2ml 復(fù)溶液1.8ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為1.8ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液3:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液4加入裝有2ml 復(fù)溶液0.6ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.6ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液2:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液3加入裝有2ml 復(fù)溶液0.2ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.2ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液1:直接使用復(fù)溶液,濃度即為0ppb。
1 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30min。
3 洗 滌:小心揭開蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干。(用吸水紙拍干,拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30min。
5 洗 滌:同上
6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15min(若藍(lán)色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。
7 終 止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
8 測(cè)吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm)。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10min內(nèi)完成。