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- 艾瑞斯 品牌
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- 深圳市 所在地
訪問次數(shù):171更新時(shí)間:2023-06-08 15:49:25
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深圳艾瑞斯生產(chǎn)的土霉素ELISA檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、蜂蜜、雞蛋等樣本中的土霉素藥物(Oxytetracycline,OTC),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的土霉素藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗土霉素藥物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含土霉素藥物含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中土霉素藥物的殘留量。
土霉素ELISA檢測試劑盒技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:37℃,30min~30min~15min
2.3 檢測下限:
組織、肝臟、雞蛋………………0.4ppb
蜂蜜………………………………2ppb
尿樣………………………………0.5ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
四環(huán)素………………………………100%
土霉素………………………………100%
金霉素………………………………16.7%
強(qiáng)力霉素……………………………4.2%
2.5 樣本回收率:
組織、肝臟、雞蛋…………85±20%
蜂蜜…………………………75±20%
尿樣…………………………80±20%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板………………………96孔
高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液1瓶:(1ml/瓶)1.0ppm(高標(biāo)準(zhǔn)液有揮發(fā)性,需注意密封)
標(biāo)準(zhǔn)品溶液0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb(均為空瓶子,現(xiàn)配現(xiàn)用)。
酶標(biāo)記物(紅蓋)…………………11ml
抗體工作液(藍(lán)蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
5×復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實(shí)驗(yàn)開始前需配制標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液;低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品不穩(wěn)定,需現(xiàn)配現(xiàn)用。
在0ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml,0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb的瓶中分別加復(fù)溶液2ml,4.05ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml。
標(biāo)準(zhǔn)液6:取1.0ppm高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液12ul加入裝有3ml 復(fù)溶液4.05ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為4.05ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液5:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液6加入裝有2ml 復(fù)溶液1.35ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為1.35ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液4:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液5加入裝有2ml 復(fù)溶液0.45ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.45ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液3:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液4加入裝有2ml 復(fù)溶液0.15ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.15ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液2:取1ml標(biāo)準(zhǔn)液3加入裝有2ml 復(fù)溶液0.05ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.05ppb。
標(biāo)準(zhǔn)液1:直接使用復(fù)溶液,濃度即為0ppb。
1 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
3 洗 滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液350µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,最后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
5 洗 滌:同上
6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過淺,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。
7 終 止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
8 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成