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金剛烷胺酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品概述
金剛烷胺酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒利用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫反應(yīng)原理,對(duì)組織(牛肉、雞肉和豬肉)和其他樣品中金剛烷胺的殘留進(jìn)行定量檢測(cè)。金剛烷胺曾被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用作抗病du藥物和抗震顫麻痹藥使用。它是1-金剛胺或1-氨基金剛烷的有機(jī)化合物,意味著它的結(jié)構(gòu)組成是一個(gè)金剛烷主鏈和四個(gè)次甲基位置中有一個(gè)取代氨基。根據(jù)美國(guó)疾病預(yù)防控制中心,金剛烷胺在美國(guó)不再被推薦用作治療流感,此外,它作為抗帕金森病藥物的有效性是不確定的,2003的Cochrane系統(tǒng)評(píng)價(jià)得出結(jié)論對(duì)它的療效和安全性的支持與反對(duì)證據(jù)不足。2005年,報(bào)道稱,中國(guó)家禽農(nóng)戶已經(jīng)使用金剛烷胺來(lái)保護(hù)禽類抗禽流感,那時(shí)起,中國(guó)政府監(jiān)管機(jī)構(gòu)已經(jīng)禁止它作為獸藥使用。
KERNELTM金剛烷胺酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒為養(yǎng)殖者和政府監(jiān)督管理部門提供了更準(zhǔn)確快速檢測(cè)金剛烷胺殘留的方法,該試劑盒有以下特點(diǎn):
? 高回收率(80%以上),快速(1小時(shí)之內(nèi)完成提取過(guò)程)低成本提取。
? 高靈敏度(0.5ppb);低檢測(cè)下限(肉類0.25ppb)。
? 檢測(cè)過(guò)程只需要不到2小時(shí)。
? 高重復(fù)性。
二、金剛烷胺酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒原理
KERNELTM金剛烷胺酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒基于競(jìng)爭(zhēng)比色酶聯(lián)反應(yīng)原理,含有金剛烷胺的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時(shí),樣品同金剛烷胺-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有金剛烷胺,會(huì)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合板上包被的抗體,抑制金剛烷胺-HRP與包被抗體結(jié)合。加入底物后,產(chǎn)物的顏色強(qiáng)弱與樣品中金剛烷胺的濃度成反比。
三、試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:各1ml
0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液(黑蓋):100ppb………1ml
酶標(biāo)記物(紅蓋) …………………11ml
抗體工作液(藍(lán)蓋) ………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
2×濃縮復(fù)溶液(黃蓋) ………………50ml
說(shuō)明書 ………………………………1份
蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個(gè)
四、運(yùn)輸與儲(chǔ)存
本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8℃的溫度下儲(chǔ)存,有效期為一年。如果超過(guò)兩周以上不使用試劑盒,請(qǐng)將金剛烷胺-HRP和金剛烷胺標(biāo)準(zhǔn)品放置-20℃冷凍保存。
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光反應(yīng)30min。
3 洗 滌:小心揭開(kāi)蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干(用吸水紙拍干,拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,25℃避光反應(yīng)30min。
5 洗 滌:同上
6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15min(若藍(lán)色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。
7 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)