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檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被L-半乳糖-1-磷酸酯酶（GPP）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的L-半乳糖-1-磷酸酯酶（GPP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品活性。

植物L(fēng)-半乳糖-1-磷酸酯酶(GPP)ELISA試劑盒組成：（標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、15、30、60、120、240 U/L）【酶聯(lián)板Assay plate 】、【標(biāo)準(zhǔn)品Standard】、【稀釋液Sample Diluent】、【檢測(cè)抗體HRP-Conjugate reagent】、【終止液Stop Solution】、【底物溶液Chromogen Solution】、【20x濃縮洗滌液20X WashSolution】、【說(shuō)明書(shū)User manual】、【封板膜Closure plate membrane】、【自封袋Sealed bags】

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1）嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果，所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃，使用后立即冷藏保存試劑。

2）洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果，在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體，溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥。

3）消除底板殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4）底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5）避免試劑盒標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6）任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體，避免影響試劑中的生物活性。

7）平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。