摘要：促卵泡素(FSH)是一個(gè) 35.5 kDa 的糖蛋白異構(gòu)體，由兩個(gè)多肽單元 組成，即α和β。其結(jié)構(gòu)與黃體生成素（LH）、促甲狀腺激素（TSH）和（hCG）的結(jié)構(gòu)相似。LH、FSH、TSH 和 hCG 糖蛋白的α 亞單位是相同的。FSH 有一個(gè) 111 個(gè)氨基酸的β亞單位（FSH β），賦予其 特定的生物作用，并負(fù)責(zé)與卵泡刺激素受體相互作用。激素的糖類部分與天 冬酰胺共價(jià)鍵合，由 N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖 和唾液酸組成。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被促卵泡素（FSH）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素（FSH）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：魚促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 定量檢測(cè)

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

魚促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 定量檢測(cè)技術(shù)小提示：

1.      當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫。

2.      為了避免交叉感染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時(shí)，請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請(qǐng)避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請(qǐng)充分混合。