【TNF-β簡(jiǎn)介】：是炎癥和免疫反應(yīng)中一種重要的介質(zhì)。它屬于TNF超家族配體并通過(guò)TNFR1和TNFR2兩種受體傳遞信號(hào)。TNF-β由活化T細(xì)胞和B細(xì)胞產(chǎn)品，并和TNF-α有相似的活性。像TNF-α一樣，TNF-β參與多種生物過(guò)程條件，包括細(xì)胞增殖、分化、凋亡、脂質(zhì)代謝、凝固和神經(jīng)傳遞。TNF-β以可溶性多肽形式分泌，但可以與β淋巴毒素形成異三聚體，其可以有效將TNF-β錨在細(xì)胞表面。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被腫瘤壞死因子β（TNF-β）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子β（TNF-β）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒組成

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒操作時(shí)注意事項(xiàng)：

1） 收到試劑盒后，為保證檢測(cè)效果，需要根據(jù)說(shuō)明書(shū)中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明，試劑盒大多再2~8℃條件下儲(chǔ)存。

2） 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說(shuō)明書(shū)一致，再進(jìn)行后續(xù)操作。

3） 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)程中，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮，過(guò)程中要避免產(chǎn)生泡沫。

4） 為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需呀更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

5） 每次孵育時(shí)，正確使用封板膠條紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

6） 正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。

7） TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色，請(qǐng)避光保存。加入孔板后，將由無(wú)色變成不同程度的藍(lán)色。

8） 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請(qǐng)充分混勻。