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中級(jí)會(huì)員 | 第3年

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ELISA試劑盒在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度

時(shí)間:2023/10/7閱讀:851
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究者進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。他們將被測(cè)試者與一臺(tái)可以檢測(cè)肌動(dòng)電流的機(jī)器相連,機(jī)器可以捕捉到他們微笑或者得到快感時(shí)的電流活動(dòng)。他們被展示不同群組的照片,這些照片蘊(yùn)含著研究者設(shè)想的象征關(guān)系:用老者象征同情,用學(xué)生表示驕傲,用吸毒者對(duì)應(yīng)厭惡,用富有人士炫富的鏡頭對(duì)應(yīng)嫉妒。這些照片隨后與不同場景加以配對(duì),如一個(gè)樂觀的事件之下。絕大多數(shù)情況下,設(shè)備發(fā)現(xiàn)人們可以從他人的不幸中獲得快感,盡管他們不會(huì)主動(dòng)報(bào)告。Fiske教授稱,人們往往不愿意報(bào)告幸災(zāi)樂禍的情緒,ELISA試劑盒所以用科學(xué)設(shè)備加以追蹤是很有必要的。

1、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。ELISA試劑盒不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

2、包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。ELIAS試劑盒蛋白質(zhì)包被的Z適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值Zda而蛋白量Z少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

3、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA試劑盒法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。


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