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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | M0500 |
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膜再生液
產(chǎn)品貨號:M0500
保存條件:4℃
產(chǎn)品簡介:
使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次Western Blot 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。
Western Blot 膜再生液特點(diǎn):
無毒無味無害,室溫下使用;可對同一張膜進(jìn)行5 次以上的Western Blot 檢測。
適用:清除硝酸纖維素膜或PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
使用方法:
1、將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,室溫洗脫10-20分鐘,具體時間長短應(yīng)該根據(jù)抗體特性進(jìn)行優(yōu)化,洗脫某些抗體需較長時間,更有長達(dá)60分鐘之久。
2、取出膜,用洗滌液(TBST等)漂洗兩三次。
3、此時膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
注意事項(xiàng):
1. 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實(shí)際操作中,膜類型、抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2. 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP。
3. 用ECL 顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入ECL 顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,須進(jìn)一步在再生液中浸泡,至膠片上無顯色。
4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜更容易再生。
5. 盡量避免讓膜干燥。
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