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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 食品,化工,生物產業(yè),農業(yè),制藥 |
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3xFlag peptide
貨號:F1001
存儲條件:-20oC保存,至少一年有效。粉末裝也可以4oC保存,一年有效。
產品簡介
3X Flag Peptide (3X Flag多肽)是一種常用于通過競爭性結合Anti-Flag抗體,從而在免疫沉淀時洗脫與Anti-Flag抗體結合的Flag融合表達蛋白的多肽。本產品用于免疫沉淀時Flag融合表達蛋白的洗脫。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23個氨基酸組成,含有3組Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重復多肽。在C端的8個氨基酸組成經典的Flag標簽(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys; DYKDDDDK)。
3X Flag Peptide (3X Flag多肽)的主要參數
別名 | Poly Flag Peptide; ddddk肽; dykddddk肽 |
描述 | 3X Flag Peptide consists of 23 amino acids. The 8 amino acids at the C-terminus form the classic Flag tag. 3X Flag Peptide is a synthetic polypeptide containing three repeats of the DYKXXD amino acid sequence |
純度 | ~98% by HPLC analyse |
分子式 | C120H169N31O49S |
分子量 | ~ 2862 |
序列 (Three-Letter Code) | Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-AspAsp-Asp-Asp-Lys |
序列 (One-Letter Code) | MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK |
來源 | 合成 |
溶劑 | TBS (50mM Tris-HCl, pH7.4, 150mM NaCl) |
使用說明:
1、粉末裝由于微量的多肽在凍干過程中沉積在管內,形成很薄或不可見的多肽層,所以在打開管蓋前,建議在離心機中約8,000-12,000×g離心10-30秒,使附著在管蓋或管壁上的多肽聚集于管底。
2、溶解時使用TBS進行溶液,用移液槍的槍頭輕吹幾下或者輕輕搖晃瓶子,即可使多肽wan全溶解。請勿用vortex劇烈振蕩,以免多肽變性而失活;溶液裝可直接用于后續(xù)配制。
3、免疫沉淀樣品的3X Flag競爭洗脫法:本方法為非變性法,洗脫效率高且洗脫后的樣品中不含Flag抗體的輕鏈和重鏈。
3.1 3X Flag多肽洗脫液的配制:根據樣品量確定洗脫液的用量,取一定量3X Flag多肽儲存液用TBS溶液進一步稀釋3X Flag多肽溶液至150μg/ml。
3.2 每個免疫沉淀樣品加入100μl 3X Flag多肽洗脫液(150μg/ml),冰浴并搖晃孵育30分鐘-2小時,為了提高洗脫效率,可延長孵育時間或重復洗脫。3X Flag多肽洗脫液體積一般為凝膠懸液的5倍。
3.3 4oC,6000×g離心30秒,小心轉移上清至新管中,上清即為洗脫的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝膠。
3.4 洗脫的Flag融合蛋白置于4oC待用,或者-20oC長期保存。