人心肌錨蛋白重復(fù)域1ANKRD1ELISA試劑盒
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人心肌錨蛋白重復(fù)域1ANKRD1ELISA試劑盒上海科培瑞生物科技有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、經(jīng)營(yíng)為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司具有具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開發(fā)平臺(tái),成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì),可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性,同時(shí)又具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格。 公司目前可以提供生化試劑、分子生物學(xué)試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門類上萬種產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。##
試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被病毒性腹瀉病毒抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。用酶標(biāo)儀在450NM波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與 CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV)的存在與否。
三.方法類型和操作步驟
間接法測(cè)抗體
間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。
⑶加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測(cè)人對(duì)某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。
⑷加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。
用途
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。