血清（血漿）樣本的制備

血清和血漿均是不含細(xì)胞（包括血小板）等有形成分的血液液體部分，其主要區(qū)別是血清不含凝-血- 因- 子和血小板，血漿則含有凝- 血- 因- 子，它們的制備方法如下：

1) 血清的制備：獲得的血液不能抗凝，盛于離心管或可以離心的器皿中，靜置或置于37℃環(huán)境中促其凝固，待血液凝固后，將其平衡并離心（一般為1000-2000g，離心 5～10 min），得到的上清液即為血清，可小心將上清吸出（注意切勿吸出細(xì)胞成分），分裝備用。

2) 血漿的制備：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑（抗凝劑：血液 = 1：9，將血液加到一定量后顛倒混勻，離心（離心條件同上）后所得的上清液即為血漿。初用者將上清移至另一清潔容器，吸出血漿時(shí)用毛細(xì)吸管貼著液面逐漸往下吸，切忌不能吸起細(xì)胞成分。

組織或細(xì)胞勻漿樣本的制備

收集組織或細(xì)胞樣本，加入勻漿介質(zhì)后進(jìn)行勻漿，有4種勻漿方式可以選擇。

1) 手工勻漿：將樣本（含勻漿介質(zhì)）倒入玻璃勻漿管中，左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的容器中，右手將搗桿垂直插入勻漿管中，上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次（6-8 min），使組織勻漿化。

2) 機(jī)械勻漿：將已稱重的組織裝入EP管，加入勻漿介質(zhì)，用組織勻漿機(jī)，在冰水浴條件下，60 Hz，90s研磨制成組織勻漿，皮膚、肌肉組織及植物組織等可適當(dāng)延長勻漿時(shí)間。

3) 超聲破碎：用超聲波發(fā)生器以振幅14 μm超聲處理30s，在冰水浴條件下，破碎細(xì)胞；或者用超聲波破碎儀，200 W，2s/次，間隙3s進(jìn)行處理，總時(shí)間5min。

4) 反復(fù)凍融：適用于細(xì)胞樣本，即用低滲液或雙蒸水重懸細(xì)胞，再將細(xì)胞懸液進(jìn)行“冷凍-融化-冷凍"循環(huán)，重復(fù)3次左右。

值得注意的是，此方法使的某些酶的活力受影響。因此，檢測細(xì)胞樣本的酶活力時(shí)不推薦使用此方法。