一、病毒滴度
病毒的滴度:單位體積(通常為mL)液體中具有生物活性的病毒顆粒數(shù)。滴度是一個病毒自身復制的數(shù)量概念,可分為物理滴度和感染滴度。物理滴度是指包含病毒基因組的病毒顆粒的濃度,可以通過通過定量PCR對病毒顆粒的基因組拷貝數(shù)進行檢測,也可以通過測定病毒顆粒中的特定蛋白進行定量,但物理滴度未考慮到病毒活性和感染效率,因此是不準確的。感染滴度是指成功轉導細胞的病毒顆粒的濃度,須通過細胞感染實驗來測定,如利用定量PCR對細胞中的病毒基因拷貝數(shù)進行檢測,或通過攜帶熒光的病毒感染細胞,利用熒光細胞數(shù)計算病毒滴度。
二、常見的病毒滴度單位
最小致死量(MLD):指在一定時間內能使試驗動物全部死亡的最小病毒量。
最小感染量(MID):指在一定時間內能使試驗動物全部發(fā)病的最小病毒量。
半數(shù)致死量(LD50):指在一定時間內能使半數(shù)試驗動物死亡的病毒量,這是zui常用的病毒滴度單位。
半數(shù)感染量(ID50):當以感染發(fā)病作指標時,則用半數(shù)感染量來測定,例如半數(shù)雞胚半數(shù)致死量(ELD50)或半數(shù)組織細胞培養(yǎng)物感染量(TCID50)。
PFU/mL(空斑形成單位每毫升):代表單位體積的病毒形成的空斑數(shù),常用于腺病毒載體的滴度標定,屬于功能單位。
TU/mL(轉導單位每毫升):單位體積中成功轉導細胞的病毒數(shù)量,常用于慢病毒載體的滴度測定,屬于功能單位。
IU/mL(整合單位每毫升):單位體積中成功轉導細胞并整合至細胞基因組的病毒數(shù)量,常用于慢病毒載體的滴度測定,屬于功能單位。
GC/mL(基因組拷貝每毫升):單位體積中病毒載體的基因組數(shù)量,常用于腺相關病毒載體的滴度測定,屬于物理單位。
VG/mL(病毒顆粒數(shù)每毫升):單位體積中病毒顆粒數(shù),可用于腺病毒載體的滴度測定,屬于物理單位。
VP/mL(病毒粒子數(shù)每毫升):單位體積中病毒粒子的數(shù)量,屬于物理單位。
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