產(chǎn)品名稱:病毒 DNA /RNA提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:TD720-50 (50 次反應(yīng))
TD720-200 (200 次反應(yīng))
產(chǎn)品亮點(diǎn):
從血清,血漿,CSF,尿液,血液,唾液,口腔拭子,糞便等液體樣品中提取到小片段和大片段的病毒基因組 DNA。
無需使用蛋白酶 K 或者有機(jī)變性劑。
提取到的病毒 DNA/RNA 可應(yīng)用于 RT-PCR,高通量測序,雜交等實(shí)驗(yàn)。
包含的 DNA /RNA保護(hù)劑可以在常溫下運(yùn)輸樣品并且滅活病毒。
產(chǎn)品特性:
1. 樣品來源:血漿,血清,培養(yǎng)物的上清液,CSF,全血,唾液,口腔拭子,糞便,尿液,及其保存在DNA/RNA保護(hù)劑中的樣品。
2. 樣品范圍:≤400µl。
3. DNA/RNA純度:高質(zhì)量的DNA/RNA可應(yīng)用于RT/PCR等敏感的下游實(shí)驗(yàn)。
4. DNA/RNA結(jié)合量:每個柱子可最多結(jié)合25µg的DNA 50µg的RNA。
5. 試劑盒內(nèi)提供的DNA/RNA保護(hù)劑可穩(wěn)定核酸并在常溫下運(yùn)輸,保護(hù)劑可有效裂解細(xì)胞并且滅活病毒。
6. 提取到高質(zhì)量病毒DNA可應(yīng)用于NGS,RT/PCR等實(shí)驗(yàn)。
溶液制備:(使用之前需要配制)
添加β-巰基乙醇到 病毒 DNA/RNA 裂解液 中,終濃度為 0.5%(可選)
例如:125µl 到 25ml 中,500µl 到 100ml 中。
添加 24 ml 100%的乙醇(26 ml 95%的乙醇)到 6 ml 的病毒洗滌液 中。
添加 96 ml 100%的乙醇(102 ml 95%的乙醇)到 24 ml 的病毒洗滌液 中。
加入后請及時在方框打鉤標(biāo)記,以免多次加入
操作步驟:
提示:所有離心步驟均在室溫 10,000-16,000 x g 下進(jìn)行
第一次使用前請先確認(rèn)病毒洗滌液中已經(jīng)添加乙醇!
以下步驟是針對 400μl 以內(nèi)體液設(shè)計的。體系可根據(jù)實(shí)際樣品量等比例調(diào)整。
首先需要去除樣品中的沉淀或不溶物,離心 1 分鐘,然后將上清轉(zhuǎn)移到一個干凈的無核酸酶的管子中。
如果樣品是血清,血漿,CSF,唾液,尿液等生物液體,從此步開始。
1. 添加 100μl 的 DNA/RNA 保護(hù)劑(2X)到每 100μl 樣品中,混勻。如果樣品是細(xì)胞懸液,全血,或已經(jīng)添加了 DNA/RNA 保護(hù)劑的樣品(口腔拭子,樣品保存管等),從此步開始。
2. 添加 400μl 的病毒 DNA/RNA 裂解液到每 200μl 的混合液中,混勻。
3. 將上述混合物加入一個 2 號柱 XL 中,2 號柱 XL 套在收集管內(nèi),離心 2 分鐘,倒掉濾出液,將2號柱XL套在一個新的收集管內(nèi)。
4. 添加 500μl 病毒洗滌液到柱中并且離心 1 分鐘,重復(fù)此步驟。
5. 添加 500μl 乙醇(95%-100%)到柱中并且離心 1 分鐘,確保去除洗滌液的殘留,然后將2號柱XL轉(zhuǎn)移到一個無 DNase/RNase 的離心管中。
6. 在吸附膜的中間部位加 50µl 無 DNA 酶/RNA 酶水(事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好),離心30秒洗脫DNA/RNA。
7. 洗脫下來的病毒 DNA/RNA 可以馬上進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn),或放置在-70℃?zhèn)溆谩?/p>
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TD720- 50 | 病毒 DNA /RNA提取試劑盒 | 50次 |
TD720- 200 | 200次 |
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