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轉(zhuǎn)染試劑的歷史背景

閱讀:1467      發(fā)布時(shí)間:2022-6-27
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  轉(zhuǎn)染(transfection)指真核細(xì)胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標(biāo)志的過程。DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)的發(fā)展對現(xiàn)代分子生物學(xué)產(chǎn)生了巨大的影響。基因轉(zhuǎn)染技術(shù)不僅是研究轉(zhuǎn)基因和基因表達(dá)的重要工具,而且是基因治療的關(guān)鍵步驟。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該具有如下特點(diǎn):高效轉(zhuǎn)染;安全;低細(xì)胞毒性;方法簡單;省時(shí)、經(jīng)濟(jì)。
 
  人們一直在尋找更有效、毒性小同時(shí)對研究影響也小的轉(zhuǎn)染試劑。由于脂質(zhì)類轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的,眾多的研究者和生物公司將新一代轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上,并已有一些優(yōu)秀的試劑產(chǎn)品上市。
 
  以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術(shù)正成為人們研究的方向。但應(yīng)用的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,仍然存在轉(zhuǎn)染效率不高和細(xì)胞毒性的問題。新的高分子聚合物轉(zhuǎn)染試劑是納米聚合物轉(zhuǎn)染試劑,由于采用新技術(shù)和新材料,具有高效、安全、低細(xì)胞毒性。其原理是:分子內(nèi)含有許多氨基,在生理PH下會(huì)發(fā)生質(zhì)子化,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負(fù)電荷,使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細(xì)胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞,形成內(nèi)含體(endosome),DNA從內(nèi)含體釋放,進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。通過納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護(hù)DNA能力強(qiáng)、毒性低的*性能。

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