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SHP-77 人小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

簡介：

SHP-77 保留了SCLC的重要特征，具有穩(wěn)定的生物化學特性，可以連續(xù)培養(yǎng)。該細胞系是小細胞肺癌中一種不常見的未分化大細胞突變體。它雖然具有突變體的形態(tài)，但保持了經(jīng)典SCLC的生化特性。電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)存在腺體形成和胞漿內(nèi)板層體(intracytoplasmic lamellar bodies)。這些細胞表達神經(jīng)內(nèi)分泌標記物L-多巴脫羧酶和致密核心分泌顆粒(dense core secretory granules)。

SHP-77可用做檢測51Cr和111In釋放對體外細胞及裸鼠體內(nèi)毒性的靶標，用于評估肺癌患者的細胞和血清的免疫反應(yīng)水平。該細胞可用于評估接受放射或化學療法治療的SCLC患者的免疫狀況。經(jīng)本庫STR檢測無誤。

細胞特性：

1） 來源：54歲 男性 肺; 小細胞肺癌

2） 形態(tài)：懸浮和松散貼壁

3） 含量：>1x10^6  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

運輸和保存：

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的注意事項：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基                87%

優(yōu)質(zhì)胎牛血清                                 10%

GlutaMAX-1谷氨/酰胺                              1%

Sodium Pyruvate丙酮酸鈉                       1%

P/S青霉/素-鏈霉/素                            1%
注意: 該細胞參考傳代周期：4-6天,參考換液頻率：每2-3天換1次液,傳代時可以輕輕拍打細胞培養(yǎng)瓶側(cè)面十余次，將懸浮的細胞進行收集離心，以40萬~50萬/ mL的密度重懸傳代。輕輕拍打后顯微鏡下觀察仍貼壁未懸浮的細胞量多的話可以繼續(xù)拍打重復收集，細胞量很少的則丟棄，不收集傳代。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完培重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

SHP-77 人小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

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