目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> 復(fù)蘇/凍存NCI-H82 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YLK-XB1312h | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | NCIH82 |
NCI-H82 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
簡介:
原始腫瘤的形態(tài)學(xué)不符合小細(xì)胞肺癌(SCLC)的特征。該細(xì)胞系在生化和形態(tài)學(xué)上是SCLC的變種,表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶。它的L-DOPA脫羧酶或蛙皮素的表達(dá)量未達(dá)到可檢測水平。該細(xì)胞產(chǎn)生一個(gè)異常大小的p53 mRNA(3.7 kb)。該細(xì)胞的C-myc DNA序列擴(kuò)增約25倍,c-myc RNA比正常細(xì)胞增加24倍。據(jù)報(bào)道該細(xì)胞表達(dá)功能性ANP受體,但用ANP處理不會改變其生長方式。該細(xì)胞的神經(jīng)絲和波形蛋白染色呈陽性,表達(dá)v-fes,v-fms,Ha-ras,Ki-ras,N-ras和c-raf 1 mRNA。經(jīng)本庫STR檢測無誤,
STR鑒定結(jié)果為:
Amelogenin: X ,CSF1PO: 11,11, D13S317: 8,8, D16S539: 12,12,D5S818: 12,12,
D7S820: 10,13,TH01: 9,9.3,TPOX: 11,11,vWA: 14,14
細(xì)胞特性:
1) 來源:人 來源于轉(zhuǎn)移灶:胸腔積液
2) 含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
3) 形態(tài):上皮樣、懸浮成團(tuán)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運(yùn)輸和保存:
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的注意事項(xiàng):
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基 87%
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%
GlutaMAX-1谷氨/酰胺 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%
P/S青霉/素-鏈霉/素 1%
備注:nci-h82 細(xì)胞懸浮聚集體,細(xì)胞以非常大的聚集體生長,聚集體是唯yi的活細(xì)胞群
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
NCI-H82 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
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