目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 96T/48T人難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/48T |
---|---|---|---|
貨號 | YLK-4364E | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研實驗 | 樣本 | 血清、血漿及相關(guān)液體樣本 |
適用物種 | 人、大鼠、小鼠、植物、動物等 | 檢測方法 | 雙抗體夾心法 |
保存條件 | 2-8℃ | 有效期 | 6個月 |
人難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)檢測試劑盒
(ELISA) 使用說明書
?人難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)的含量。
? 有效期:6個月
? 保存條件:2-8℃
? 本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷
實驗原理實驗
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的難辨梭狀芽孢桿菌毒素A(TOXA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑盒組成
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
樣品收集、處理及保存方法
1)血清 操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后1000×g 離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿 EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液 1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿 將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g 離心 10 分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
備注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 U/L
2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本/稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
試劑盒性能
1. 檢測范圍:2.5 U/L – 80 U/L。
2. 靈敏度:Z低檢測濃度小于 0.1 U/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10% ,板間變異系數(shù)小于 15% 。
注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
說明
由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
1. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
2. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
3. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。
4. 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
5. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA 實驗結(jié)果偏差。
6. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
相關(guān)產(chǎn)品
人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-macrophage antibody ELISA KIT |
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA KIT |
人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-red cell antibody ELISA KIT |
人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA KIT |
人抗核仁抗體(ANA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA KIT |
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA KIT |
人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA KIT |
人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab ELISA KIT |
人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA KIT |
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA KIT |
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA KIT |
人抗白蛋白抗體(AAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human anti-albumin antibody,AAA ELISA KIT |
人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | Human purkinje cell autoantibody,PCA-1/Yo ELISA KIT |
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)