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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存人乳腺上皮細胞

人乳腺上皮細胞
  • 人乳腺上皮細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 ATCC
  • 型號 復蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-09 09:10:01瀏覽次數(shù):403評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB0526h 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 乳腺組織
人乳腺上皮細胞來源于乳腺小葉中。它們與腺體導管和脂肪組織一起在乳腺中形成復雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。乳腺上皮細胞在人和動物體出生、發(fā)育和妊娠中均會受荷爾蒙調(diào)控而進行一系列的增長、遷移和分化。激素水平失調(diào)、細胞外基質(zhì)的變化和其它的基因因素都會導致乳腺上皮細胞惡性增長,最終導致乳腺癌的發(fā)生。了解乳腺上皮細胞的特性可以幫助我們理解乳腺癌的病例機制以及為治療確定新的靶點。

人乳腺上皮細胞


產(chǎn)品名稱 :人乳腺上皮細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0526h

組織來源 :乳腺組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

乳腺上皮細胞分離自乳腺組織。乳腺是復管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導管末梢發(fā)育成腺泡。

近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細胞(M EC ) 有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)M EC s即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控,其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長型細胞,呈多角形、圓形以及短梭形。乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。


細胞特性

1)細胞來源于人正常乳腺組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :上皮細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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