目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存CF-1 MEF小鼠胚胎成纖維細胞
CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | YLK-XB0382h | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 |
CF-1 MEF小鼠胚胎成纖維細胞
簡稱:CF-1 MEF
中文名:小鼠胚胎成纖維細胞
別名:小鼠胚胎成纖維細胞;CF-1 MEF細胞
種屬:小鼠
來源:胚胎;成纖維細胞;CF-1
培養(yǎng)條件:DMEM
培養(yǎng)環(huán)境:空氣,95%; 二氧化碳 (CO2),5%
狀態(tài):貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細胞培養(yǎng)操作步驟:
1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞;
2. 吸干凈PBS后
加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。
注意事項:不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
Cell cryopreservation
1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
凍存方法:
1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存。
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