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人N鈣/神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cad）檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
用途：用于科研實(shí)驗(yàn)。
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存： 2-8℃。
2．有效期： 6個(gè)月
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如

酶聯(lián)科興生物人N鈣/神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cad）檢測試劑盒

*,質(zhì)量保證。

天津酶聯(lián)科興生物長期專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,包括人、大小鼠、牛羊馬猴等各種種屬的ELISA試劑盒。本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平

注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

產(chǎn)品名稱酶聯(lián)科興生物人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體（M-CSFR）檢測試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格 96T/48T

保存 2-8°C

有效期 6個(gè)月

產(chǎn)品說明書咨詢銷售人員獲取說明書

人N鈣/神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cad）檢測試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔層粘連蛋白(LN)水平。用純化的兔層粘連蛋白(LN)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入兔層粘連蛋白(LN),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔層粘連蛋白(LN)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔層粘連蛋白(LN)含量。

、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

人N鈣/神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cad）檢測試劑盒

自備物品:

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3 、精密移液器及一次性吸頭

4 、蒸餾水

5 、一次性試管

6 、吸水紙

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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