1. 預(yù)期用途

上述標(biāo)準(zhǔn)已被開發(fā)用于替代第一個國際 Alpha 凝血酶標(biāo)準(zhǔn) (89/588) 和美國標(biāo)準(zhǔn)凝血酶 Lot J。新標(biāo)準(zhǔn)的效力為 110 IU/安瓿，相當(dāng)于 110 美國單位/安瓿.兩種凝血酶國際標(biāo)準(zhǔn)（WHO 國際 Alpha 凝血酶標(biāo)準(zhǔn)，89/588 和美國標(biāo)準(zhǔn)凝血酶，批次 J）庫存不足，需要開發(fā)替代制劑。兩個標(biāo)準(zhǔn)的替換提供了一個機會來開發(fā)一個具有共同單位的聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)，從而消除了由現(xiàn)有單位和標(biāo)準(zhǔn)之間的微小但取決于測定的差異引起的問題（國際標(biāo)準(zhǔn)中的 IU 和美國單位美國標(biāo)準(zhǔn)的情況，通常也稱為“NIH 單位"）。組織了一項合作研究，涉及來自全球 15 個國家的 25 個實驗室 (1)。國際標(biāo)準(zhǔn) (89/588) 和美國標(biāo)準(zhǔn)批次 J 與制造商捐贈的兩種候選凝血酶制劑一起包括在內(nèi)。根據(jù)這項研究的結(jié)果，其中一種制劑 01/580 被選為替代標(biāo)準(zhǔn)，并被規(guī)定為 WHO 凝血酶第二國際標(biāo)準(zhǔn) 01/580 和美國 FDA/CBER 凝血酶標(biāo)準(zhǔn)批次K. 國際標(biāo)準(zhǔn)由世界衛(wèi)生組織生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會于 2003 年 2 月制定。

2. 注意

NIBSC 01/580 凝血酶人(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該制劑含有人類來源的材料，最終產(chǎn)品或從中提取的原材料都經(jīng)過測試，發(fā)現(xiàn) HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈陰性。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

校準(zhǔn)替代凝血酶標(biāo)準(zhǔn)品的合作研究的參與者被要求使用他們常用的試劑執(zhí)行他們內(nèi)部的凝血酶效力測定方法。可以使用纖維蛋白原或血漿底物或替代地使用顯色方法進行效力測定。如果可能，鼓勵參與者執(zhí)行不止一種方法。使用國際標(biāo)準(zhǔn)和美國標(biāo)準(zhǔn)作為參考標(biāo)準(zhǔn)計算候選材料的效力。還進行了進一步分析以確定是否對所用不同底物的結(jié)果有任何影響：人纖維蛋白原、牛纖維蛋白原、血漿和顯色底物。研究的結(jié)論是候選材料 D，編碼 01/580，是國際標(biāo)準(zhǔn)和美國標(biāo)準(zhǔn)的合適替代標(biāo)準(zhǔn)。這種材料的效力是 110 IU/安瓿。該數(shù)字是使用來自使用人或牛纖維蛋白原或血漿的所有凝血測定的結(jié)果計算的。顯色測定的結(jié)果未用于計算該值。

不確定性：分配的單元不帶有與其校準(zhǔn)相關(guān)的不確定性。因此，不確定性可能是被認(rèn)為是安瓿含量的變化，并確定為 +/- 0.07%。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

用于制備標(biāo)準(zhǔn)品的純化凝血酶由制造商慷慨提供，作為人凝血酶的純化溶液，由混合血漿制備，比活度為 2000-3000 IU/mg。將材料作為冷凍溶液運送至 NIBSC，然后將其解凍并在 10 mM Hepes、pH 7.4、含有 0.15M NaCl 和 5 mg/ml 人白蛋白溶液的溶液中稀釋至約 100 IU/ml 的濃度（蛋白酶活性低）。將該溶液以 1 ml 等分試樣分配到安瓿中。灌裝操作總共得到 9676 個安瓿，平均灌裝重量為 1.0061 克（cv = 0.07%）。冷凍干燥后，安瓿的平均干重為 0.0184g (cv = 1.13%)，殘留水分為 0.17% (cv = 12.4%)。凝血酶標(biāo)準(zhǔn)的 α 凝血酶含量尚不清楚，但國際合作研究表明，凝血與顯色活性的比率與之前的第一個 α 凝血酶國際標(biāo)準(zhǔn) 89/588 (1) 非常相似。

5. 存儲

NIBSC 01/580 凝血酶人(標(biāo)準(zhǔn)品)  未開封的安瓿瓶應(yīng)儲存在 –20°C 或以下的黑暗中。

請注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會在環(huán)境溫度下運輸這些材料。

6. 開瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個“易開"顏色的壓力點，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機可商購獲得。要打開安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進行操作。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量凍干材料的任何部分。安瓿的內(nèi)容物應(yīng)溶解在 1 ml 蒸餾水中，所得溶液在冰上儲存并在 4 小時內(nèi)使用。