PolyShooter HP 核酸轉(zhuǎn)染試劑

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子導(dǎo)入真核細(xì)胞內(nèi)以改變其基因型或表型的一種技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制基因功能的常規(guī)手段，廣泛應(yīng)用于基因功能研究、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析，以及基因治療、細(xì)胞治療、蛋白生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)等領(lǐng)域。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。其中化學(xué)介導(dǎo)方法因其兼具高效低毒、方便快捷等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用廣泛?；瘜W(xué)介導(dǎo)方法包括經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法以及多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法。

理想的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。脂質(zhì)體和陽離子聚合物是目前研究最多的人工合成載體。脂質(zhì)體對細(xì)胞膜具有很高的親和力，它們可以很容易地通過內(nèi)吞作用或直接膜融合進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，并通過脂質(zhì)-磷脂交換釋放結(jié)合的DNA。因此，這些材料通常具有較高的轉(zhuǎn)染效率。然而，脂質(zhì)體在基因遞送方面具有關(guān)鍵的局限性，包括可重復(fù)制備性差，以及一定的細(xì)胞毒性。市面上多種商業(yè)化的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑要求細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳，這有助于減少陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性造成的影響。但是，如果研究的基因要求比較長的表達(dá)時(shí)間，例如細(xì)胞周期相關(guān)基因，或者細(xì)胞表面蛋白，又或者轉(zhuǎn)染后續(xù)需要進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)和功能研究，則不適合用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑。陽離子聚合物載體是另一類研究較多的人工合成載體。這些聚合物通過離子相互作用與DNA形成納米尺寸的復(fù)合物。陽離子聚合物在基因遞送方面具有幾個(gè)**的特征，例如，易于制造、配方穩(wěn)定、易于修飾等。目前，眾多的研究者和生物公司將新一代轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上，以尋找更高效低毒，同時(shí)對研究影響較小的轉(zhuǎn)染試劑。

PolyShooter HP 核酸轉(zhuǎn)染試劑（LeapWal PolyShooter HP Transfection Reagent，P19110）是一種基于陽離子高分子聚合物的新型轉(zhuǎn)染試劑，適用于DNA、RNA的轉(zhuǎn)染。其原理為帶正電的高分子聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后，與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，隨后在胞質(zhì)中釋放，實(shí)現(xiàn)外源核酸的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

PolyShooter HP Transfection Reagent (P19110)是在PolyShooter Transfection Reagent (P09110)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的性能更優(yōu)異的陽離子高分子聚合物轉(zhuǎn)染試劑，適用于DNA、RNA的轉(zhuǎn)染。其原理為帶正電的高分子聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后，與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，隨后在胞質(zhì)中釋放，實(shí)現(xiàn)外源核酸的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。P19110與P09110的基因轉(zhuǎn)染原理是相似的，但是，P19110在P09110使用的陽離子高分子表面引入了細(xì)胞穿膜肽和內(nèi)涵體逃逸促進(jìn)劑，其細(xì)胞內(nèi)吞能力和內(nèi)涵體逃逸能力進(jìn)一步增強(qiáng)，以保證更多的復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，從而實(shí)現(xiàn)更優(yōu)異的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果。

PolyShooter HP 核酸轉(zhuǎn)染試劑（LeapWal PolyShooter HP Transfection Reagent，P19110）對多種常見細(xì)胞、難轉(zhuǎn)細(xì)胞、原代細(xì)胞均具有高水平轉(zhuǎn)染效率，具有高效低毒、操作簡單、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。其**的配方使其可直接加入培養(yǎng)基中，血清的存在不會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率，這樣可以減少去除血清對細(xì)胞的損傷。同時(shí)，轉(zhuǎn)染后不需要除去PolyShooter HP Transfection Reagent-核酸復(fù)合物或更換新鮮培養(yǎng)基，也可根據(jù)具體情況優(yōu)化轉(zhuǎn)染體系。