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抑菌圈測(cè)量原理分析介紹

閱讀:3583      發(fā)布時(shí)間:2023-7-7
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  一、抑菌圈法又叫擴(kuò)散法,是利用待測(cè)藥物在瓊脂平板中擴(kuò)散使其周圍的細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈,根據(jù)抑菌圈大小判定待測(cè)藥物抑菌效價(jià)的一種方法。抑菌圈法操作便捷、簡(jiǎn)單易行、成本低廉、結(jié)果準(zhǔn)確可靠,是抑菌試驗(yàn)的經(jīng)典方法,被廣泛使用。常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑制工具菌生長(zhǎng)的物質(zhì),如抗生素等,便會(huì)在該菌落周圍形成工具菌不能生長(zhǎng)的抑菌圈,很容易被鑒別出來(lái)。
 
  二、主要有K-B法(Kirby-Bauertest)、牛津杯法和打孔法三種。K-B法即濾紙片法,選用質(zhì)地均勻的濾紙,用打孔機(jī)打成直徑相同的圓片,滅菌后烘干,浸泡于待測(cè)樣品中,然后置于試驗(yàn)平板中培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定抑菌圈大小的一種方法。牛津杯法又稱杯碟法,將已滅菌的牛津杯置于試驗(yàn)平板中,往杯中注入一定量的待測(cè)樣品,培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定抑菌圈大小的一種方法。打孔法,是指用已滅菌的打孔器或鋼管在試驗(yàn)平板上打孔,往孔中注入一定量的待測(cè)樣品,培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定抑菌圈大小的一種方法。
 
  三、菌種的活化及菌液的制備:將冷凍保存的菌種劃線接種至平板培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24h;挑單菌落接種至100mL液體培養(yǎng)基,37℃、200r/min搖床培養(yǎng)過(guò)夜,菌液備用。傾注平板法:先往已滅菌的平板中接種1mL菌液,然后傾注約20mL已冷卻至50℃左右的平板培養(yǎng)基,混合均勻,水平靜置凝固后備用。預(yù)加菌液傾注平板法:往已冷卻至50℃左右的平板培養(yǎng)基中注入一定量的菌液,混合均勻,傾注平板(約20mL/平板),水平靜置凝固后備用。
 
  四、結(jié)果表明:打孔法操作簡(jiǎn)單、方便快捷,獲得的抑菌圈質(zhì)量高、重復(fù)性好,是優(yōu)先選用的方法。

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