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細(xì)胞凋亡檢測(cè)

人體內(nèi)的細(xì)胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡則是病理性的，有關(guān)細(xì)胞死亡過(guò)程的研究，已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。已知的細(xì)胞死亡方式起碼有兩種，即細(xì)胞壞死與細(xì)胞凋亡(apoptosis)。細(xì)胞壞死是早已被認(rèn)識(shí)到的一種細(xì)胞死亡方式，而細(xì)胞凋亡則是逐漸被認(rèn)識(shí)的一種細(xì)胞死亡方式。

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檢測(cè)方法

細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，不同區(qū)域內(nèi)（如細(xì)胞膜、細(xì)胞漿、線粒體、細(xì)胞核等）會(huì)發(fā)生不同的生理生化改變。因此，針對(duì)不同區(qū)域的細(xì)胞凋亡檢測(cè)要采用不同的方法。

1）Annexin V 凋亡檢測(cè)

原理：Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結(jié)合蛋白，正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine, PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V作為一種磷脂結(jié)合蛋白，與PS有高度親和力，它通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V是檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。該方法通常結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)一起使用。

2）線粒體膜電位分析（JC-1）

3）Caspase活性檢測(cè)

4）TUNEL凋亡檢測(cè)

細(xì)胞凋亡是生命的基本現(xiàn)象，是維持體內(nèi)細(xì)胞數(shù)量動(dòng)態(tài)平衡的基本措施。在胚胎發(fā)育階段通過(guò)細(xì)胞凋亡清除多余的和已完成使命的細(xì)胞，保證了胚胎的正常發(fā)育；在成年階段通過(guò)細(xì)胞凋亡清除衰老和病變的細(xì)胞，保證了機(jī)體的健康。和細(xì)胞增殖一樣細(xì)胞凋亡也是受基因調(diào)控的精確過(guò)程。