RNA pull down實(shí)驗(yàn)技術(shù)

1. 實(shí)驗(yàn)原理

RNA pull down是體外研究RNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)是用生物素標(biāo)記體外轉(zhuǎn)錄的靶RNA分子，再用鏈霉親和素純化出與靶RNA結(jié)合的蛋白復(fù)合體，洗脫得到RNA結(jié)合蛋白質(zhì)。再通過(guò)western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)特定的RNA結(jié)合蛋白是否與靶RNA結(jié)合；或通過(guò)質(zhì)譜儀檢測(cè)可以篩選出與靶RNA結(jié)合的蛋白。

生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強(qiáng)度最高的非共價(jià)作用；其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)。因此用生物素標(biāo)記核酸后，可以純化出與該核酸結(jié)合的各種生物大分子復(fù)合物。

2. 實(shí)驗(yàn)流程

1）探針設(shè)計(jì)及標(biāo)記：體外轉(zhuǎn)錄或合成獲取RNA，生物素標(biāo)記;

2）pull down：與細(xì)胞裂解液孵育，形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物。該復(fù)合物可與鏈霉親和素磁珠結(jié)合，從而把靶RNA結(jié)合蛋白從細(xì)胞裂解液中分離出來(lái)，經(jīng)過(guò)洗滌將非特異性結(jié)合蛋白質(zhì)去除；最后，洗脫得到與靶RNA結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物；

3）互作蛋白質(zhì)鑒定：再經(jīng)過(guò)Western Blot（WB）或質(zhì)譜(MS)鑒定蛋白質(zhì)。

3. 服務(wù)內(nèi)容

1）體外轉(zhuǎn)錄或合成RNA，生物素標(biāo)記；

2）細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞裂解液制備；

3）pull down捕獲互作蛋白；

4）Western blot驗(yàn)證互作蛋白；

5）MS篩選鑒定互作蛋白。

4. 交付結(jié)果

1）提供詳細(xì)、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告；

2）客觀公正的原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。

更多細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)

細(xì)胞低氧培養(yǎng)模型

原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)

小管形成實(shí)驗(yàn)

單克隆形成實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)

細(xì)胞遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)

TUNEL法細(xì)胞凋亡檢測(cè)

流式法細(xì)胞凋亡檢測(cè)

細(xì)胞衰老檢測(cè)

細(xì)胞免疫熒光觀察

......

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè)，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細(xì)胞系和多種原代細(xì)胞、質(zhì)量穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著“守正創(chuàng)新，科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)"的理念，我們以高標(biāo)準(zhǔn)塑造行業(yè)品牌，以全新視野構(gòu)建現(xiàn)代企業(yè)，勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國(guó)各省市自治區(qū)，與國(guó)內(nèi)多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系，贏得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認(rèn)可，我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)！

細(xì)胞系(帶STR鑒定) | 原代細(xì)胞 | 細(xì)胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細(xì)胞培養(yǎng)添加因子 | 標(biāo)記細(xì)胞 | 耐藥細(xì)胞 | 生化檢測(cè)試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA測(cè)序分析 | Pull down實(shí)驗(yàn) | RIP 實(shí)驗(yàn) | ChIP實(shí)驗(yàn) | Co-IP實(shí)驗(yàn) | 質(zhì)譜檢測(cè) | WB檢測(cè) | PCR檢測(cè) | 細(xì)胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測(cè) | micro-CT 檢測(cè)  等。更多信息，歡迎垂詢上海昆盟生物科技有限公司。