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Biozellen類器官3D培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝

Biozellen®基質(zhì)膠特點

1、100%植物源材料，無任何動物成分；

2、胺基酸序列100%人源化 ；

3、可調(diào)控基質(zhì)膠硬度進行多種細胞培養(yǎng)；

4、3D細胞/類器官培養(yǎng)種類數(shù)量范圍更廣；

5、無人畜共通病原菌或毒素風險；

6、較為適用于醫(yī)療級生物原料；

7、高活性、高純度、可融化；

8、3D培養(yǎng)結(jié)束后基質(zhì)膠可以溫和融化，并保留3D細胞/類器官結(jié)構(gòu)完整性。

Biozellen類器官3D培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝

Catalog No.   B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10

Specification  2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

Storage       -20℃運輸， 1 年保存

一、產(chǎn)品描述

Biozellen®3D 類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑，可進行 3D 類器官培養(yǎng)與微環(huán)境等相 關(guān)實驗應(yīng)用； 本試劑盒操作便利且可調(diào)控膠體硬度進行多種類器官培養(yǎng)測試；高分子膠體可快速形成水凝 膠， 建議操作此培養(yǎng)膠體前詳讀此使用指南。 （Biozellen®3D 類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠材料為植物來源，無動物成分）

二、應(yīng)用

• 3D 類器官培養(yǎng)。

• 適合用于 3D 類器官藥物篩檢平臺

三、適用細胞種類

• 原代細胞

• 干細胞

四、試劑盒組分

五、使用步驟：

A.試劑制備

A 基質(zhì)膠：將 A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10 分鐘， 確認*融解. C 緩沖溶液(1X)制備：使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養(yǎng)液(例如： 無血清 DMEM、opt-MEM) 制 備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) . D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B.Biozellen®3D 類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備

全部步驟需要在無菌環(huán)境內(nèi)操作，操作步驟如下：

1. 將 24 孔培養(yǎng)板放置于冰上預(yù)冷。

2. 細胞計數(shù)后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合，并與 0.5 毫升 37℃ A 膠按照 1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度 105~107cells/mL。 注：請選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進行試驗，貼壁細胞應(yīng)在~80% 匯合度下培養(yǎng)。

3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預(yù)冷的培養(yǎng)板上，膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的 1X C 緩沖溶液，并蓋過步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。

5.待 15 分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養(yǎng)基溶液。

6 將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進行 7~14 天的培養(yǎng)，并觀察細胞球體的形成，按正常培養(yǎng)基 更換頻率進行更換操作。

C.溶膠與收集細胞球體準備程序

小心的將培養(yǎng)基吸取移除，并用 1X PBS 進行清洗。 小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過膠滴于室溫反應(yīng) 5 分鐘。 溫和的用 1 毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。 將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用 1000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 10 分鐘，移除上清液體并收集細胞 球體做分析。

D.收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

1. 添加 trypsin-EDTA 并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應(yīng)。

2. 用 1 毫升移液管混合，直到細胞體*分解。

3. 待細胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進行離心 10 分鐘，并移除上清 液體收集沉淀的單細胞做分析。

六、案例分享

A.形成 3D 腫瘤球體成功案例分享

B.Biozellen 基質(zhì)膠被溶解后分離的完整 3D 細胞結(jié)構(gòu)照片

培養(yǎng)后的 3D 細胞球體， 在 Biozellen 基質(zhì)膠被試劑盒里面的 D Buffer 溶解分離后仍然可以得到完整的 3D 細胞結(jié)構(gòu)

僅供研究使用

深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D培養(yǎng)基質(zhì)膠大量現(xiàn)貨，經(jīng)驗證可*替代BD/康寧的基質(zhì)膠，來源為植物源且氨基酸序列100%人源化，無人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經(jīng)理聯(lián)系尋求幫助。