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細(xì)胞轉(zhuǎn)染簡(jiǎn)介：

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來越廣泛。

轉(zhuǎn)染 ，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例;化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù);生物介導(dǎo)方法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。而ZETA LIFE的第三代多肽小分子新型材料轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率較高的方法，同時(shí)具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢(shì)。且不需要更換培養(yǎng)基；特點(diǎn)是不需要換液，無(wú)細(xì)胞毒性，轉(zhuǎn)染效率高，適用細(xì)胞種類多，可轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA、siRNA及小動(dòng)物活體轉(zhuǎn)染。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法，則各有其特點(diǎn)。

小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑系列規(guī)格貨號(hào)：

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD600025      0.25ml

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD600050      0.5ml

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD600075      0.75ml

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD600150      1.5ml

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD600500      5ml

品牌：美國(guó)Zeta Life     貨號(hào)：AD601000      10ml

產(chǎn)品名稱：

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

儲(chǔ)存條件：

常溫運(yùn)輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水，但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會(huì)下降 80%左右，甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。

2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素，內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生很大的細(xì)胞毒性，會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右，甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒）。

3、復(fù)合物的制備過程中是絕不能用其他任何試劑對(duì)核酸或轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋，只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合，如果進(jìn)行了稀釋會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。

4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次，室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細(xì)胞培養(yǎng)板。

5、轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后進(jìn)行正常換液，不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時(shí)后換液。

6、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)，細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。

小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果：

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