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I-高效細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用:
- 各種細(xì)胞類型中最高的轉(zhuǎn)染效率。
-Advanced DNA RNA Transfection Reagent™可用于多種真核細(xì)胞系的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染和共轉(zhuǎn)染。
-Advanced DNA RNA Transfection Reagent™可用于各種原代細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染。
二、產(chǎn)品描述:
Advanced DNA RNA Transfection Reagent™ 是一種新開(kāi)發(fā)的高效細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中。
儲(chǔ)存條件:4°C(不可冷凍)
有效期:2年
III-轉(zhuǎn)染要求
質(zhì)粒DNA:200ng/ul-2ug/ul;
溶于ddH 2 O或超純水;
去除內(nèi)毒素;
siRNA:20 uM/L
IV-轉(zhuǎn)染程序
1. 提前1天在細(xì)胞培養(yǎng)板上種植細(xì)胞,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞融合度應(yīng)為60-80%,并保持細(xì)胞狀態(tài)。轉(zhuǎn)染應(yīng)在良好狀態(tài)下進(jìn)行。
2、復(fù)合制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按1:1的比例直接混合,然后用移液器吹10-15次混合。室溫孵育10-15分鐘后,制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物。在復(fù)合物的制備過(guò)程中,確保管壁上沒(méi)有液體殘留物。
3. 在細(xì)胞培養(yǎng)板中加入轉(zhuǎn)染復(fù)合物,輕輕混勻,放入CO 2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)染梯度
細(xì)胞培養(yǎng)板 | 96孔 | 48孔 | 24孔 | 12孔 | 6孔 | 35 毫米 | 60 毫米 | 100 毫米 | 25 | 75 |
轉(zhuǎn)染試驗(yàn)d osag È (UL) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
脫氧核糖核酸 d奧沙(UG) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
siRNA d奧沙(UL) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
培養(yǎng)基 劑量 | 125ul | 250ul | 500ul | 1ml | 2ml | 2.5ml | 5ml | 15ml | 6ml | 19ml |
V-細(xì)胞活力分析:
使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(K009,ZETA LIFE Inc.)評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng) ,這是細(xì)胞活力的間接測(cè)量。
VI-重要指導(dǎo)方針:
-質(zhì)粒DNA必須溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中,轉(zhuǎn)染效率會(huì)下降70%,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗。
-質(zhì)粒DNA必須去內(nèi)毒素,否則轉(zhuǎn)染效率會(huì)下降70%,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗。
- 在制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物過(guò)程中,不得使用其他試劑稀釋核酸或轉(zhuǎn)染試劑。只需將核酸和轉(zhuǎn)染試劑按照1:1的關(guān)系直接混合即可。否則,轉(zhuǎn)染效率將下降80%,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗。
-檢查并與轉(zhuǎn)染試劑混合后,用移液管吹吸10-15次以充分混合,確保管壁無(wú)液體殘留。
- 將核酸與轉(zhuǎn)染試劑混合并在室溫下孵育至少 10-15 分鐘。
- 將復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板并輕輕混勻,將板置于 CO 2 培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
- 在整個(gè)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,細(xì)胞可以在*培養(yǎng)基中培養(yǎng),而不是使用無(wú)血清培養(yǎng)基。
- 如果轉(zhuǎn)染后顯微鏡下觀察到白色或黑色圓形顆粒,則為轉(zhuǎn)染試劑的新材料顆粒。
訂單信息
產(chǎn)品 | 目錄 | 尺寸 |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600025 | 0.25ml |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD600050 | 0.5 ml |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD6 00075 | 0.75ml |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD6 00100 | 1.0 ml |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD6 00500 | 5.0 ml |
高級(jí) DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑 | AD6 01000 | 10.0ml |
深圳市安培生物科技有限公司推出高效細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,轉(zhuǎn)染試劑經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證,轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳。尊敬的客戶您如在訂購(gòu)過(guò)程中遇到任何問(wèn)題都可以與我司在線客服聯(lián)系尋求幫助,新客戶也可聯(lián)系申請(qǐng)?jiān)囉醚b。
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